X******n 发帖数: 914 | 1 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics,目的是找它们的作用底物,获得了
一堆数据,初步分析后得到了一个network,现在想对其中一些(磷酸化)相互关系进
行验证,如果用in vitro phosphorylation assay 的话,工作量太大;用band shift
呢,很多蛋白没有明显变化;看到有人用Anti-Phosphotyrosine, anti-
Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查,不知道可行性有多大。哪位
大牛有相关经验,能不能说说看?有没有谁用过这些抗体,效果怎么样?非常感谢! |
w******e 发帖数: 1187 | 2 不能接着用MS吗?土人土问呵呵
shift
【在 X******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics,目的是找它们的作用底物,获得了 : 一堆数据,初步分析后得到了一个network,现在想对其中一些(磷酸化)相互关系进 : 行验证,如果用in vitro phosphorylation assay 的话,工作量太大;用band shift : 呢,很多蛋白没有明显变化;看到有人用Anti-Phosphotyrosine, anti- : Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查,不知道可行性有多大。哪位 : 大牛有相关经验,能不能说说看?有没有谁用过这些抗体,效果怎么样?非常感谢!
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r****r 发帖数: 379 | 3 since you already know the phos sites, you can ask companies to make the
antibodis which are against those sites, the sucsess rate should be more
or less 50%
shift
【在 X******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics,目的是找它们的作用底物,获得了 : 一堆数据,初步分析后得到了一个network,现在想对其中一些(磷酸化)相互关系进 : 行验证,如果用in vitro phosphorylation assay 的话,工作量太大;用band shift : 呢,很多蛋白没有明显变化;看到有人用Anti-Phosphotyrosine, anti- : Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查,不知道可行性有多大。哪位 : 大牛有相关经验,能不能说说看?有没有谁用过这些抗体,效果怎么样?非常感谢!
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X******n 发帖数: 914 | 4 我也想过pulldown 后做MS,可是老板不同意,我们的MS core太慢了。
我想做10个以上的确证,如果做抗体我们做不起。 |
r****r 发帖数: 379 | 5 20,000$ for 20 customer phos antibodies and u can negotiate with the company
to get a much more lower price if u don't want to keep the IP. |
X******n 发帖数: 914 | 6 Thanks for this info. Could you please give me a name/link of the company?
company
【在 r****r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 20,000$ for 20 customer phos antibodies and u can negotiate with the company : to get a much more lower price if u don't want to keep the IP.
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