X******n
发帖数: 914 | 1 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics，目的是找它们的作用底物，获得了
一堆数据，初步分析后得到了一个network，现在想对其中一些（磷酸化）相互关系进
行验证，如果用in vitro phosphorylation assay 的话，工作量太大；用band shift
呢，很多蛋白没有明显变化；看到有人用Anti-Phosphotyrosine， anti-
Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查，不知道可行性有多大。哪位
大牛有相关经验，能不能说说看？有没有谁用过这些抗体，效果怎么样？非常感谢！ |
w******e
发帖数: 1187 | 2 不能接着用MS吗？土人土问呵呵
shift
【在 X******n 的大作中提到】
: 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics，目的是找它们的作用底物，获得了
: 一堆数据，初步分析后得到了一个network，现在想对其中一些（磷酸化）相互关系进
: 行验证，如果用in vitro phosphorylation assay 的话，工作量太大；用band shift
: 呢，很多蛋白没有明显变化；看到有人用Anti-Phosphotyrosine， anti-
: Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查，不知道可行性有多大。哪位
: 大牛有相关经验，能不能说说看？有没有谁用过这些抗体，效果怎么样？非常感谢！
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r****r
发帖数: 379 | 3 since you already know the phos sites, you can ask companies to make the
antibodis which are against those sites, the sucsess rate should be more
or less 50%
shift
【在 X******n 的大作中提到】
: 用SILAC做了十几个蛋白激酶的phosporproteomics，目的是找它们的作用底物，获得了
: 一堆数据，初步分析后得到了一个network，现在想对其中一些（磷酸化）相互关系进
: 行验证，如果用in vitro phosphorylation assay 的话，工作量太大；用band shift
: 呢，很多蛋白没有明显变化；看到有人用Anti-Phosphotyrosine， anti-
: Phosphothreonine, anti-phosphoserine的抗体进行检查，不知道可行性有多大。哪位
: 大牛有相关经验，能不能说说看？有没有谁用过这些抗体，效果怎么样？非常感谢！
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X******n
发帖数: 914 | 4 我也想过pulldown 后做MS，可是老板不同意，我们的MS core太慢了。
我想做10个以上的确证，如果做抗体我们做不起。 |
r****r
发帖数: 379 | 5 20,000$ for 20 customer phos antibodies and u can negotiate with the company
to get a much more lower price if u don't want to keep the IP. |
X******n
发帖数: 914 | 6 Thanks for this info. Could you please give me a name/link of the company?
company
【在 r****r 的大作中提到】
: 20,000$ for 20 customer phos antibodies and u can negotiate with the company
: to get a much more lower price if u don't want to keep the IP.
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