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Biology版 - conditional KO怎么检测?
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D***a
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1
我是新手,实验室搞到几只老鼠,loxp/cre KO那种,是smooth muscle特异的,不知道
生出小老鼠能用什么方法检测?谢谢大家。
q******g
发帖数: 3858
2
qPCR, western
i*********0
发帖数: 915
3
cre PCR and your gene specific PCR.
最后分析的时候,用wb检测在相关组织检测一下你的目的蛋白是不是存在。
D***a
发帖数: 516
4
谢谢你和楼上。仔细想了一下,子代有很多种可能,得到纯合KO的几率很低,每只都要
做PCR。不大可能得到2只亲本,之后子代都是100%KO的,是吧?

【在 i*********0 的大作中提到】
: cre PCR and your gene specific PCR.
: 最后分析的时候,用wb检测在相关组织检测一下你的目的蛋白是不是存在。

i*********0
发帖数: 915
5
我觉得不大可能,除非cre transgene是multi-copy intergration。不然的话,理论上
来说是75%的ko cre+后代。
D***a
发帖数: 516
6
一般来说cre是one copy,特定染色体,还是不知道有多少copy,随机整合的呢?对这
些老鼠怎样做出来的一窍不通。

【在 i*********0 的大作中提到】
: 我觉得不大可能,除非cre transgene是multi-copy intergration。不然的话,理论上
: 来说是75%的ko cre+后代。

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