s*********r
发帖数: 13 | 1 第一次做克隆,不是很sure一些细节,请教各位达人
我接一段蛋白进vector,vector N端有tag,我不abolish蛋白本身的ATG可以不可以呢,或
者会有潜在的风险?....
谢谢各位 | p****p
发帖数: 3360 | 2 只要两段的codon是in-frame的，没有问题。
【在 s*********r 的大作中提到】
: 第一次做克隆,不是很sure一些细节,请教各位达人
: 我接一段蛋白进vector,vector N端有tag,我不abolish蛋白本身的ATG可以不可以呢,或
: 者会有潜在的风险?....
: 谢谢各位
| r****r
发帖数: 379 | 3 这个要看具体情况，最后是去掉ORF的ATG
如果前面是个小tag，那么有的时候会从ORF自身的ATG开始翻译
如果前面是个gfp这样的tag，一般问题就不大了
【在 p****p 的大作中提到】
: 只要两段的codon是in-frame的，没有问题。
| h*********5
发帖数: 464 | | a****d
发帖数: 1919 | 5 建议去掉ORF本身的ATG，如果N端只是很短的tag | s*********r
发帖数: 13 | 6 那看起来Flag tag和HA tag 应该是不行.....太小了
谢谢^^
【在 r****r 的大作中提到】
: 这个要看具体情况，最后是去掉ORF的ATG
: 如果前面是个小tag，那么有的时候会从ORF自身的ATG开始翻译
: 如果前面是个gfp这样的tag，一般问题就不大了
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