小白请教分子克隆 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 小白请教分子克隆

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s*********r 发帖数: 13	1 第一次做克隆,不是很sure一些细节,请教各位达人我接一段蛋白进vector,vector N端有tag,我不abolish蛋白本身的ATG可以不可以呢,或者会有潜在的风险?.... 谢谢各位
p****p 发帖数: 3360	2 只要两段的codon是in-frame的，没有问题。【在 s*********r 的大作中提到】 : 第一次做克隆,不是很sure一些细节,请教各位达人 : 我接一段蛋白进vector,vector N端有tag,我不abolish蛋白本身的ATG可以不可以呢,或 : 者会有潜在的风险?.... : 谢谢各位
r****r 发帖数: 379	3 这个要看具体情况，最后是去掉ORF的ATG 如果前面是个小tag，那么有的时候会从ORF自身的ATG开始翻译如果前面是个gfp这样的tag，一般问题就不大了【在 p****p 的大作中提到】 : 只要两段的codon是in-frame的，没有问题。
h*********5 发帖数: 464	4 no problem
a****d 发帖数: 1919	5 建议去掉ORF本身的ATG，如果N端只是很短的tag
s*********r 发帖数: 13	6 那看起来Flag tag和HA tag 应该是不行.....太小了谢谢^^ 【在 r****r 的大作中提到】 : 这个要看具体情况，最后是去掉ORF的ATG : 如果前面是个小tag，那么有的时候会从ORF自身的ATG开始翻译 : 如果前面是个gfp这样的tag，一般问题就不大了

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