h**********r 发帖数: 671 | 1 最近想用QIAquick Gel Extraction Kit回收一个72bp的片段,有没有人有过类似的经
验?
回收效率怎么样?回收之后做亚克隆的。
多谢! |
a***y 发帖数: 19743 | 2 你没有protocol本本?
【在 h**********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近想用QIAquick Gel Extraction Kit回收一个72bp的片段,有没有人有过类似的经 : 验? : 回收效率怎么样?回收之后做亚克隆的。 : 多谢!
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a***a 发帖数: 40617 | 3 比较难,好像manual上下限100
【在 h**********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近想用QIAquick Gel Extraction Kit回收一个72bp的片段,有没有人有过类似的经 : 验? : 回收效率怎么样?回收之后做亚克隆的。 : 多谢!
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a********k 发帖数: 2273 | 4 Gel purification下限是70吧,PCR purification kit下限100,nucleotide removal
kit下限40。
胶回收短片段可以用QG buffer溶胶,加isopropanol,再用nucleotide removal的柱子
就行了。反正三个柱子都是通用 的。
【在 a***a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比较难,好像manual上下限100
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d****i 发帖数: 2346 | 5 mini plasmid的那个柱子是最好的,吸附量最大,回收的也就最多。 |
d****i 发帖数: 2346 | 6 片段太小了,你电泳能看得清楚吗?
合成不贵的话可以直接设计好末端合成,然后直接连接。不用切的那种。
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a***a 发帖数: 40617 | 7 本人多次验证,gel extraction的紫柱子吸附量起码是miniprep那个蓝柱子的2倍
【在 d****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : mini plasmid的那个柱子是最好的,吸附量最大,回收的也就最多。
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d****i 发帖数: 2346 | 8 我没有验证,但是里面的垫料应该越后吸附量越大。
【在 a***a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 本人多次验证,gel extraction的紫柱子吸附量起码是miniprep那个蓝柱子的2倍
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s******r 发帖数: 2876 | 9 那你验证验证再说。
我没有验证,但是里面的垫料应该越后吸附量越大。
【在 d****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我没有验证,但是里面的垫料应该越后吸附量越大。
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a***a 发帖数: 40617 | 10 要是发文章也能这样就好了
【在 d****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我没有验证,但是里面的垫料应该越后吸附量越大。
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S*****s 发帖数: 287 | 11 gel extraction 有两种 kit,一种是用 column 纯化,另一种是用 beads 纯化,和做
co-ip 的 beads 差不多。100bp 的小片段最好还是买那种 beads 纯化的 kit 比较好
,产量也高。 |
w******e 发帖数: 1187 | 12 70~80%吧。100bp的
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h**********r 发帖数: 671 | |
C*******e 发帖数: 4348 | 14 我觉得QIAGEN的胶纯化kit挺烂的,洗脱体积又大,回收率又低
比较过以后我们实验室后来都用Zymo的 |
y****m 发帖数: 37 | 15 always hate qiagen gel pure kit
recommend sigma,
just cut and spin |