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Biology版 - 问一下western blot sample sticky 的问题
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a******5
发帖数: 18
1
我是新手做western, 我想问问 我lyse cell 以后, 得到supernatant, 然后加入
SDS heat 以后sample 就变得sticky了, 这样的sample 能跑western 吗
有人遇到过这样的问题吗, 怎么处理呢
s******r
发帖数: 2876
2
sonicate。

我是新手做western, 我想问问 我lyse cell 以后, 得到supernatant, 然后加入
SDS heat 以后sample 就变得sticky了, 这样的sample 能跑western 吗
有人遇到过这样的问题吗, 怎么处理呢

【在 a******5 的大作中提到】
: 我是新手做western, 我想问问 我lyse cell 以后, 得到supernatant, 然后加入
: SDS heat 以后sample 就变得sticky了, 这样的sample 能跑western 吗
: 有人遇到过这样的问题吗, 怎么处理呢

a******5
发帖数: 18
3
对不起 我忘了说了 我sonicate过以后,得到supernatant,然后加SDS,加热变性,后
来还是sticky。
w******e
发帖数: 1187
4
pass syringe

【在 a******5 的大作中提到】
: 我是新手做western, 我想问问 我lyse cell 以后, 得到supernatant, 然后加入
: SDS heat 以后sample 就变得sticky了, 这样的sample 能跑western 吗
: 有人遇到过这样的问题吗, 怎么处理呢

j*****5
发帖数: 24
5
我觉得是你的样品太多了,一要多加点lysis buffer. 然侯多pipette几次就会好了。
j*****5
发帖数: 24
6
忘了说一句,这样的样品跑western 也可以,但是结果可能不会很好看,建议dilute
之后再用。
w****8
发帖数: 36
7
明显是genomic dna没有去掉,加点nacl,成淀。
d*******w
发帖数: 45
8
一般加完SDS loading sample buffer 后,煮一下,基本上就不粘了,再sonicate 几
秒钟就行了。
a*****n
发帖数: 2835
9
煮,煮完之后马上放冰上,冷下来之后再离心就没有问题了

【在 a******5 的大作中提到】
: 我是新手做western, 我想问问 我lyse cell 以后, 得到supernatant, 然后加入
: SDS heat 以后sample 就变得sticky了, 这样的sample 能跑western 吗
: 有人遇到过这样的问题吗, 怎么处理呢

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