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Biology版 - 请问一个 SDS-PAGE 的奇怪问题
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相关话题的讨论汇总
话题: page话题: sds话题: 问题话题: 左边话题: 重跑
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T****s
发帖数: 915
1
这几天跑一个蛋白胶,发现跑出来的入图右侧所示。
图左边的蛋白跑的很好,说明不是胶的问题。
请问大侠们,这可能是什么原因?
救命啊~~
T**********t
发帖数: 1604
2
可能是胶的问题,可能是样品的问题,可能是电泳槽的问题。。。
不过有问问题的时间,重跑一个都出来了。。。
h****j
发帖数: 230
3
self made gel? very possible it's a bad gel.
voltage too high?

【在 T****s 的大作中提到】
: 这几天跑一个蛋白胶,发现跑出来的入图右侧所示。
: 图左边的蛋白跑的很好,说明不是胶的问题。
: 请问大侠们,这可能是什么原因?
: 救命啊~~

T****s
发帖数: 915
4
要是有问题都重做来解决的话,很奇怪你怎么现在还没累死。
C*********d
发帖数: 12
5
是样品BUFFER组分不同而造成的:细胞LYSATE过稠会尤其会造成这样的结果。
d********n
发帖数: 1013
6
重跑一个胶很困难吗? 听说这种情况可能是各个lane里面的loading buffer量差别太大.

【在 T****s 的大作中提到】
: 要是有问题都重做来解决的话,很奇怪你怎么现在还没累死。
T**********t
发帖数: 1604
7
显然我还没有累死,要不然哪有时间来灌水。
说实话,重跑一个也就两个小时吧,你问个问题等到现在一天了吧,有标准答案了么?
一般我碰到烂胶都是重跑,如果是偶然现象就不管了,如果是可重复的我再
troubleshooting。

【在 T****s 的大作中提到】
: 要是有问题都重做来解决的话,很奇怪你怎么现在还没累死。
b******h
发帖数: 17
8
最大可能:玻璃板没有洗干净,或者是K+污染了板子。
b******h
发帖数: 17
9
实话说,左边的蛋白跑的不咋地。
C*********d
发帖数: 12
10
是这样的:左边那些道的样品是不是某高盐洗脱,上样体积比较大,而右边是细胞浓度
高的裂解液,粘稠。
建议将细胞稀释在大一点的同种缓冲液,裂解完全,上相同大小体积。

【在 C*********d 的大作中提到】
: 是样品BUFFER组分不同而造成的:细胞LYSATE过稠会尤其会造成这样的结果。
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到底怎么抽提全细胞蛋白呀?有人利用果蝇的larva做过western吗?
做完蛋白Co-IP后,如何上样跑SDS-PAGE?SDS-PAGE 蛋白电泳的问题。
求一个5X或者6XSDS protein sample buffer 配方Troubleshooting for SDS-PAGE. Smear on low molecular proteins
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b******h
发帖数: 17
11

上相同大小体积。
exactly~

【在 C*********d 的大作中提到】
: 是这样的:左边那些道的样品是不是某高盐洗脱,上样体积比较大,而右边是细胞浓度
: 高的裂解液,粘稠。
: 建议将细胞稀释在大一点的同种缓冲液,裂解完全,上相同大小体积。

y******n
发帖数: 8667
12
盐浓度太高?
以前知道Ca高了,会变形。
n****e
发帖数: 1677
13
样品的盐浓度太高?或者loading buffer用量不同?

【在 T****s 的大作中提到】
: 这几天跑一个蛋白胶,发现跑出来的入图右侧所示。
: 图左边的蛋白跑的很好,说明不是胶的问题。
: 请问大侠们,这可能是什么原因?
: 救命啊~~

l*****i
发帖数: 190
14
玻璃板没有洗干净.
There are many pops on the right.
S***l
发帖数: 323
15
左边的胶也很丑,要是我的话,真不好意思拿出手
s*******g
发帖数: 3332
16
不至于吧,我觉得左边的挺好啊

【在 S***l 的大作中提到】
: 左边的胶也很丑,要是我的话,真不好意思拿出手
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