请问Co-IP with FLAG tagged proteins - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请问Co-IP with FLAG tagged proteins

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c*********t 发帖数: 340	1 如果想证明A和B相互作用，在CELL LINE里表达FLAG epitope-tagged A 然后证明B也能一起被PULL DOWN 这个方法有什么缺点吗（我觉得这种大量表达某种蛋白可能会造成某些ARTEFACT？）为什么要用FLAG TAGGED A呢直接拿cell lysate做CoIP为什么不行呀请达人指点下，多谢！：）
i********d 发帖数: 7	2 anti-FLAG的抗体做IP比较好，的确外源性表达的蛋白有可能出现artifical effect. 直接用cell lysate的话，可能因为目的蛋白抗体的原因，不适合做IP，或是很难做，外源性tagged的蛋白好做多了。
s******y 发帖数: 28562	3 可能是因为内源蛋白的量不够多，做出来的结果不漂亮呗。这个当然可能会造成假象。【在 c*********t 的大作中提到】 : 如果想证明A和B相互作用，在CELL LINE里表达FLAG epitope-tagged A : 然后证明B也能一起被PULL DOWN : 这个方法有什么缺点吗（我觉得这种大量表达某种蛋白可能会造成某些ARTEFACT？） : 为什么要用FLAG TAGGED A呢 : 直接拿cell lysate做CoIP为什么不行呀 : 请达人指点下，多谢！：）

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