T**********t 发帖数: 1604 | 1 这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture
就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能
确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。 |
T**********t 发帖数: 1604 | 2 另外我还有个culture,长得速度正常,可是会出现这种团状悬浮物,摇也摇不散。我
以前有culture overgrow的时候也没有这种情况出现,看着又不像是真菌污染,这个又
会是什么情况呢?
culture
【在 T**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture : 就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能 : 确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。
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c********g 发帖数: 15 | 3 你在长啥菌
culture
【在 T**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture : 就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能 : 确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。
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T**********t 发帖数: 1604 | 4 E.coli的BL21(DE3)pLysS strain。带的质粒是个小质粒,表达的蛋白不大,只有7kD,
没有细胞毒性。用的培养基是LB+M9 salts,抗生素是Amp+Chloramphenicol。关键是以
前摇菌(同一个strain)都没有这个问题,最近屡屡出现,我不知道是哪里
contaminate了,如果是phage的话,就恐慌了,据说很难清除phage。
【在 c********g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你在长啥菌 : : culture
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c********g 发帖数: 15 | 5 你有没有streak for isolation 以后 take single colony,然后把antibiotics和
medium都换过吗?
inoculate的时候小心些,不要用什么牙签之类的,也不要用wire loop。。试试用长的
sterile的pipette
看着跟bacilli似的
【在 T**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : E.coli的BL21(DE3)pLysS strain。带的质粒是个小质粒,表达的蛋白不大,只有7kD, : 没有细胞毒性。用的培养基是LB+M9 salts,抗生素是Amp+Chloramphenicol。关键是以 : 前摇菌(同一个strain)都没有这个问题,最近屡屡出现,我不知道是哪里 : contaminate了,如果是phage的话,就恐慌了,据说很难清除phage。
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T**********t 发帖数: 1604 | 6 我都是从streak的fresh plate上挑的单菌落。Medium和antibiotics肯定是好的。
inoculate我都是用sterile pipette tips。
如果是bacilli,为什么一开始会是正常的cloudy的菌液,然后慢慢变清出现这种悬浮
纤维状物质呢?我没养过bacilli,不知道它的生长状况是如何的。
第二张图里那种一团团的菌体是什么呢?除了它之外,那管菌液本身的生长状态和浊度
倒是挺正常的。
【在 c********g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你有没有streak for isolation 以后 take single colony,然后把antibiotics和 : medium都换过吗? : inoculate的时候小心些,不要用什么牙签之类的,也不要用wire loop。。试试用长的 : sterile的pipette : 看着跟bacilli似的
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