w******e
发帖数: 1187 | 1 取mouse blood低速离心取plasma，volume只占不到一半，这个正常吗？
另外，我想测的是RNA aptamer在blood里的half life，用plasma靠谱吗？就是
说里面RNAse够多吗？
再另外，有人用plasma不加phenol/ethanol直接做过RT吗？我把plasma dilute
50X后加1ul到20ul RT reaction里，用qPCR定量，跟positive control差不多。
还试了多往RT reaction里加plasma，也没影响@@也不知道是否正常呵呵
第一次做，请大家多指点。//bow |
w******e
发帖数: 1187 | 2 ding~
【在 w******e 的大作中提到】
: 取mouse blood低速离心取plasma，volume只占不到一半，这个正常吗？
: 另外，我想测的是RNA aptamer在blood里的half life，用plasma靠谱吗？就是
: 说里面RNAse够多吗？
: 再另外，有人用plasma不加phenol/ethanol直接做过RT吗？我把plasma dilute
: 50X后加1ul到20ul RT reaction里，用qPCR定量，跟positive control差不多。
: 还试了多往RT reaction里加plasma，也没影响@@也不知道是否正常呵呵
: 第一次做，请大家多指点。//bow
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l*h
发帖数: 4124 | 3 正常成年人的血浆占血液体积的~55%，靠低速离心也还有一些血浆收不出来，供参考。
不记得老鼠的数据。
【在 w******e 的大作中提到】
: 取mouse blood低速离心取plasma，volume只占不到一半，这个正常吗？
: 另外，我想测的是RNA aptamer在blood里的half life，用plasma靠谱吗？就是
: 说里面RNAse够多吗？
: 再另外，有人用plasma不加phenol/ethanol直接做过RT吗？我把plasma dilute
: 50X后加1ul到20ul RT reaction里，用qPCR定量，跟positive control差不多。
: 还试了多往RT reaction里加plasma，也没影响@@也不知道是否正常呵呵
: 第一次做，请大家多指点。//bow
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w******e
发帖数: 1187 | 4 多谢！请问你对我后面的问题有经验吗？
正常成年人的血浆占血液体积的~55%，靠低速离心也还有一些血浆收不出来，供参考。
不记得老鼠的数据。
【在 l*h 的大作中提到】
: 正常成年人的血浆占血液体积的~55%，靠低速离心也还有一些血浆收不出来，供参考。
: 不记得老鼠的数据。
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w***e
发帖数: 269 | 5 1st, 正常.一般是比一半稍微少一些,因为红细胞大概占一半的体积.
the rest, no clue. |
D****g
发帖数: 275 | 6 The plasma should be around 55-60% if you spin down at 10,000g for 5-10 min,
if you get more than that, your mice may have anemia, if you get less than
that, your mice may have polycythemia. |
D*a
发帖数: 6830 | 7 我感觉差不多是一半一半吧，但是没精确量过
楼上用10，000g没事啊？我才用4000 rpm |
w******e
发帖数: 1187 | 8 10000g??! I used 800g... don't you worry about cell lysis?
min,
than
【在 D****g 的大作中提到】
: The plasma should be around 55-60% if you spin down at 10,000g for 5-10 min,
: if you get more than that, your mice may have anemia, if you get less than
: that, your mice may have polycythemia.
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O******e
发帖数: 4845 | 9 估计是typo.
【在 w******e 的大作中提到】
: 10000g??! I used 800g... don't you worry about cell lysis?
:
: min,
: than
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