F*******2
发帖数: 103 | 1 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
大的恐慌。
大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
cell stock也都污染了。
现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
，但是我觉得其实大家心里都觉得我的细胞是源头。我觉得我们实验室现在已经造成了
很大的损失，而且感觉都是我造成的，现在超级难过。
我平常做实验真的还小心翼翼的，我养的细胞从来没有被细菌什么污染过，只是前一阵
子忽然发现我养的细胞tansfect之后死亡率很高，之前transfect还好。现在真觉得我
是不是以后都不要在这个实验室混了。。。
而且隔壁实验室的一个大老板那里的细胞应该也被污染了（因为他们实验室总问我们借
细胞），我是不是也不要想去那个大老板那里做rotation了，他是不是也恨死我了。。
。 |
w******e
发帖数: 1187 | 2 talk to your advisor. state all the facts. express your worry. be humble
but don't admit anything. If he likes you, he will protect you from this
then the whole thing will cool down over time.
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
: concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
: cell stock也都污染了。
: 现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
|
P**l
发帖数: 3722 | |
p****l
发帖数: 291 | 4 你觉得不是自己的问题，就心理素质好一点
或者说脸皮厚一点，别人怀疑你随便，关键是不要给老板造成不好的印象
我有一次用显微镜拍bright field照片，拍6孔板的，别人很少这么拍
结果我拍完1几个星期以后，40倍的镜头坏了
负责显微镜的mm就高度怀疑是我弄坏的，但是我确信不是自己弄坏的，因为我只用20倍
而且根本没有转镜头
后来他们跟老板说要买新镜头，几千吧，我老板也没找我
不过你要是觉得自己有问题的话，；老板nice可以跟老板说一下的，大家都是讲道理的
我刚开始做实验的时候把半瓶b巯基乙醇洒hood里了，老师也没说我
不过后来我自己头疼了一晚上
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
: concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
: cell stock也都污染了。
: 现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
|
i*********0
发帖数: 915 | 5 老板没说,并不是表示他不记得噢.
【在 p****l 的大作中提到】
: 你觉得不是自己的问题，就心理素质好一点
: 或者说脸皮厚一点，别人怀疑你随便，关键是不要给老板造成不好的印象
: 我有一次用显微镜拍bright field照片，拍6孔板的，别人很少这么拍
: 结果我拍完1几个星期以后，40倍的镜头坏了
: 负责显微镜的mm就高度怀疑是我弄坏的，但是我确信不是自己弄坏的，因为我只用20倍
: 而且根本没有转镜头
: 后来他们跟老板说要买新镜头，几千吧，我老板也没找我
: 不过你要是觉得自己有问题的话，；老板nice可以跟老板说一下的，大家都是讲道理的
: 我刚开始做实验的时候把半瓶b巯基乙醇洒hood里了，老师也没说我
: 不过后来我自己头疼了一晚上
|
F*******2
发帖数: 103 | 6 我觉得我真的是倒霉到家了～～因为我平常做细胞实验真的超小心的，酒精都是喷了又
喷。。。我们实验室不用antibiotics的，我也没污染过细胞，怎么就遇到这种事～～ |
s******r
发帖数: 2876 | 7 这没什么大不了的，很常见，
也不干你的事，不用担心，尤其是不能心虚。
我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
大的恐慌。
大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
cell stock也都污染了。
现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
，但是我觉得其实大家心里都觉得我的细胞是源头。我觉得我们实验室现在已经造成了
很大的损失，而且感觉都是我造成的，现在超级难过。
我平常做实验真的还小心翼翼的，我养的细胞从来没有被细菌什么污染过，只是前一阵
子忽然发现我养的细胞tansfect之后死亡率很高，之前transfect还好。现在真觉得我
是不是以后都不要在这个实验室混了。。。
而且隔壁实验室的一个大老板那里的细胞应该也被污染了（因为他们实验室总问我们借
细胞），我是不是也不要想去那个大老板那里做rotation了，他是不是也恨死我了。。
。
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
: concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
: cell stock也都污染了。
: 现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
|
a*****n
发帖数: 2835 | 8 没什么大不了的，这种污染很常见，细胞死亡也不见得就是因为这个
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
: concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
: cell stock也都污染了。
: 现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
|
F*******2
发帖数: 103 | 9 可是为啥我们实验室的人都超恐慌，大家都说近期不想做实验了。。。因为做出来的结
果也不能让人信服
【在 s******r 的大作中提到】
: 这没什么大不了的，很常见，
: 也不干你的事，不用担心，尤其是不能心虚。
:
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
|
p******d
发帖数: 3737 | 10 mycoplasm污染不是你的错，一般都是试剂带进来的，不用觉得内疚。所有现用的试剂
可能都要从新买过配过了。但是原来冻的细胞除非本来就有问题，要不然不太会在
liqN2里面被污染的。从别人实验室要细胞本来就要担这个风险，我们实验室原来要别
人的细胞也发现了mycoplasm。这种事情不能怪你，大老板这一点应该心里有素。
你心理压力实在不用太大，实验室现在气氛不好，但是过去了大家就想通了。我第一个
轮转的实验室在我轮转的时候发生了核素污染，被罚了500块，然后就有美国人开玩笑
样说是我这个新手干的，我就懒得理他们。那个实验室每个人都天天做核素，凭什么因
为我是新手就怀疑我，我是女生又新手，小心程度比他们高多了。反正最后为了不做核
素，也没有留在这个实验室，但是这个老板当时还蛮想留我的。轮转的时候把project
做好一点，老板看工作量，别的都是小事。说不好听，好多实验室有了mycoplasm污染
都不知道的，平时只要细胞长的好也不太发现得了，都像鸵鸟一样不知道就算了。 |
|
|
s******y
发帖数: 28562 | 11 Agree. Mycoplasma is usually derived from reagent such as serum, not from
human, unless you have an active mycoplamsa infection in your lung and
happen to cough into the culture hood.
project
【在 p******d 的大作中提到】
: mycoplasm污染不是你的错，一般都是试剂带进来的，不用觉得内疚。所有现用的试剂
: 可能都要从新买过配过了。但是原来冻的细胞除非本来就有问题，要不然不太会在
: liqN2里面被污染的。从别人实验室要细胞本来就要担这个风险，我们实验室原来要别
: 人的细胞也发现了mycoplasm。这种事情不能怪你，大老板这一点应该心里有素。
: 你心理压力实在不用太大，实验室现在气氛不好，但是过去了大家就想通了。我第一个
: 轮转的实验室在我轮转的时候发生了核素污染，被罚了500块，然后就有美国人开玩笑
: 样说是我这个新手干的，我就懒得理他们。那个实验室每个人都天天做核素，凭什么因
: 为我是新手就怀疑我，我是女生又新手，小心程度比他们高多了。反正最后为了不做核
: 素，也没有留在这个实验室，但是这个老板当时还蛮想留我的。轮转的时候把project
: 做好一点，老板看工作量，别的都是小事。说不好听，好多实验室有了mycoplasm污染
|
p******i
发帖数: 1092 | 12 mycoplasm很常見啊……幹嘛往自己身上攬？
你們實驗室大家都不想做實驗，正好拿這個事來當藉口……
【在 F*******2 的大作中提到】
: 可是为啥我们实验室的人都超恐慌，大家都说近期不想做实验了。。。因为做出来的结
: 果也不能让人信服
|
s******y
发帖数: 28562 | 13 Well, mycoplasma is a big problem. If it happens to me I will throw out
every cell and begin again.
【在 F*******2 的大作中提到】
: 可是为啥我们实验室的人都超恐慌，大家都说近期不想做实验了。。。因为做出来的结
: 果也不能让人信服
|
c******r
发帖数: 3778 | 14 nod nod, 完全同意
project
【在 p******d 的大作中提到】
: mycoplasm污染不是你的错，一般都是试剂带进来的，不用觉得内疚。所有现用的试剂
: 可能都要从新买过配过了。但是原来冻的细胞除非本来就有问题，要不然不太会在
: liqN2里面被污染的。从别人实验室要细胞本来就要担这个风险，我们实验室原来要别
: 人的细胞也发现了mycoplasm。这种事情不能怪你，大老板这一点应该心里有素。
: 你心理压力实在不用太大，实验室现在气氛不好，但是过去了大家就想通了。我第一个
: 轮转的实验室在我轮转的时候发生了核素污染，被罚了500块，然后就有美国人开玩笑
: 样说是我这个新手干的，我就懒得理他们。那个实验室每个人都天天做核素，凭什么因
: 为我是新手就怀疑我，我是女生又新手，小心程度比他们高多了。反正最后为了不做核
: 素，也没有留在这个实验室，但是这个老板当时还蛮想留我的。轮转的时候把project
: 做好一点，老板看工作量，别的都是小事。说不好听，好多实验室有了mycoplasm污染
|
n********k
发帖数: 2818 | 15 very common problem...and it was estimated that 50% or above labs have this
problem...if everything u say is true/objective, I think ur coworkers are
overreacting and partly being ignorant...besides, it doesn't seem ur lab has
a good pratice either in term of mycoplasm prevention...it is recommended
that to test monthly or several times a year if one is really concerned
about it...
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我是一年级的phd，还在rotation阶段，前一阵子我养的细胞transfect之后总是死，再
: 之后我们实验室的很多人做transfection都不成功或者其他assay也有问题。然后老板
: 今天叫了某个公司的人来做mycoplasma test，测了我的2个细胞line和另外一个人的细
: 胞line。测出来的结果是所有的细胞line都被mycoplasma污染了，然后实验室陷入了极
: 大的恐慌。
: 大家纷纷在讨论过去这2个月细胞实验是不是白做了，然后还在讲我们department多少
: 人问我们借过细胞line，然后我们是不是把其他实验室的细胞也都污染了。还有一个
: concern就是我前一阵子刚freeze了一些细胞stock，他们担心是不是所有放在一起的
: cell stock也都污染了。
: 现在实验室还在恐慌之中，因为一切是从我的细胞总是死开始的，所以虽然大家没明说
|
a****d
发帖数: 1919 | 16 半瓶b巯基乙醇洒hood里? 这个还是太危险了。。。
【在 p****l 的大作中提到】
: 你觉得不是自己的问题，就心理素质好一点
: 或者说脸皮厚一点，别人怀疑你随便，关键是不要给老板造成不好的印象
: 我有一次用显微镜拍bright field照片，拍6孔板的，别人很少这么拍
: 结果我拍完1几个星期以后，40倍的镜头坏了
: 负责显微镜的mm就高度怀疑是我弄坏的，但是我确信不是自己弄坏的，因为我只用20倍
: 而且根本没有转镜头
: 后来他们跟老板说要买新镜头，几千吧，我老板也没找我
: 不过你要是觉得自己有问题的话，；老板nice可以跟老板说一下的，大家都是讲道理的
: 我刚开始做实验的时候把半瓶b巯基乙醇洒hood里了，老师也没说我
: 不过后来我自己头疼了一晚上
|
w***a
发帖数: 4361 | 17 nod,支原体污染显微镜底下看不见，大部分lab也不测这个，很多cell line对支原体也
不敏感。所以污染了就污染了，反正paper照样发...
【在 a*****n 的大作中提到】
: 没什么大不了的，这种污染很常见，细胞死亡也不见得就是因为这个
|
M*******a
发帖数: 15 | 18 It has been estimated that at least 11 to 15% of U.S. laboratory cells
cultures are contaminated with mycoplasma. A Corning study showed that half
of U.S. scientists did not test for mycoplasma contamination in their cell
cultures. The International Organization of Mycoplasmology also stated that,
in Czechoslovakia, 100% of cell cultures that were not routinely tested
were contaminated while only 2% of those routinely tested were contaminated.
Since the U.S. contamination rate was based on a study of companies that
routinely checked for mycoplasma, the actual contamination rate may be
higher. European contamination rates are higher and that of other countries
are higher still (up to 80% of Japanese cell cultures). |
k****y
发帖数: 423 | 19 不用过分自责，我怀疑你们实验室的细胞本来就有myco污染，只不过你用的细胞比较敏
感，所以raise the issue,不然说不定都发现不了。很多细胞特别是贴壁细胞的growth
/proliferation 在myco污染之后都没有影响的。再者如果细胞比较难获得，可以不用
扔掉，用mycoplasma removal reagent，比如plasmocin就可以，一般2-3个星期就可以
除掉。以后实验室常备mycoplasma detection kit，隔段时间测一次就行。 |
s*****g
发帖数: 7857 | 20 our lab uses plasmocin to remove mycoplasma. |
|
|
g*********9
发帖数: 3528 | 21 nod nod nod.
只怕楼主的实验室其他人早就怀疑有污染了，只是data 照出，大家都没有bring it up
而已。
这回就是利用一下机会，毕竟谁都想知道有没有污染。
【在 c******r 的大作中提到】
: nod nod, 完全同意
:
: project
|
c******r
发帖数: 3778 | 22 这话说的是。其实没哪个实验室真的测这个东西，虽然很简单。
对了，这东西可以treat的
http://www.invivogen.com/family.php?ID=3
这东东可以常规加culture里面，不知道有没有人这么干？
呵呵，这culture里面的东西越来越多，不知道对cell有没有影响？
up
【在 g*********9 的大作中提到】
: nod nod nod.
: 只怕楼主的实验室其他人早就怀疑有污染了，只是data 照出，大家都没有bring it up
: 而已。
: 这回就是利用一下机会，毕竟谁都想知道有没有污染。
|
s***o
发帖数: 1189 | 23
up
I second this and would highly suggest you find another lab.
The atmosphere in this group is not healthy. And problem like this generally
seeds from lacking proper managerial skills of the top, meaning: you can do
nothing and may only take heat. As a rotation student you have a long way
to go to get to the PhD level and during this process you need lots of
SINCERE help from your colleagues, which i just don't see it happen in this
group.
You are blaming yourself too much. If you are certain you have strictly
follow the protocol and not the source of corruption,I'd say the reason why
cells died after YOUR transfection is you having used a condition harsh to
those unhealthy cells, albeit perfectly normal for normal cell line.
If you want, you could try testing a range of low dosage trasfectant and
possibly with other more smoothing ways (e.g. reducing the times of medium
changing). I bet those cells could still grow and produce some data and i'd
say that's how someone else in your group has done for a while.
Good luck.
【在 g*********9 的大作中提到】
: nod nod nod.
: 只怕楼主的实验室其他人早就怀疑有污染了，只是data 照出，大家都没有bring it up
: 而已。
: 这回就是利用一下机会，毕竟谁都想知道有没有污染。
|
s***o
发帖数: 1189 | 24
Getting rid of mycoplasma is the only solution.
Plasmocin has undesirable effects on results.
The undesirability varies by assay.
【在 c******r 的大作中提到】
: 这话说的是。其实没哪个实验室真的测这个东西，虽然很简单。
: 对了，这东西可以treat的
: http://www.invivogen.com/family.php?ID=3
: 这东东可以常规加culture里面，不知道有没有人这么干？
: 呵呵，这culture里面的东西越来越多，不知道对cell有没有影响？
:
: up
|
x****z
发帖数: 3473 | 25 mycroplasma contamination is not likely to be airborn, not likely due to
your technique.
Must from some reagent contamination. It's not a big deal. Don't worry too
much.
【在 F*******2 的大作中提到】
: 我觉得我真的是倒霉到家了～～因为我平常做细胞实验真的超小心的，酒精都是喷了又
: 喷。。。我们实验室不用antibiotics的，我也没污染过细胞，怎么就遇到这种事～～
|
c******r
发帖数: 3778 | 26 哦？真的啊？没经验，谢谢提醒！
【在 s***o 的大作中提到】
:
: Getting rid of mycoplasma is the only solution.
: Plasmocin has undesirable effects on results.
: The undesirability varies by assay.
|
s***o
发帖数: 1189 | 27
Oh, it still works to some extent and I believe some are using it.
Just a serious scientist wouldn't rely much on data generated under those
suboptimal condition,
in my humble opinion ;-)
【在 c******r 的大作中提到】
: 哦？真的啊？没经验，谢谢提醒！
|
c******r
发帖数: 3778 | 28 haha，赞serious scientist！
不过这里的生物男可能多数没那么认真，只要能产paper就好。
真的应该好好学习你的认真精神！
【在 s***o 的大作中提到】
:
: Oh, it still works to some extent and I believe some are using it.
: Just a serious scientist wouldn't rely much on data generated under those
: suboptimal condition,
: in my humble opinion ;-)
|
w*****3
发帖数: 910 | 29 不要怕，我当postdoc 的时候，做小鼠实验。
后来一只跑出来了。 全实验室的人来抓，没抓着。
老板还去找了个鼠笼子。我买了peanut butter 也没抓住。
后来不知道跑哪去了。
实验室养的老鼠不会自己生活，肯定不知道死那个楼道里。
实验室出些小问题，太普遍了。
有名的医生还出医疗事故呢。
【在 w******e 的大作中提到】
: talk to your advisor. state all the facts. express your worry. be humble
: but don't admit anything. If he likes you, he will protect you from this
: then the whole thing will cool down over time.
|
s**a
发帖数: 1906 | 30 这个猛。。。
【在 w*****3 的大作中提到】
: 不要怕，我当postdoc 的时候，做小鼠实验。
: 后来一只跑出来了。 全实验室的人来抓，没抓着。
: 老板还去找了个鼠笼子。我买了peanut butter 也没抓住。
: 后来不知道跑哪去了。
: 实验室养的老鼠不会自己生活，肯定不知道死那个楼道里。
: 实验室出些小问题，太普遍了。
: 有名的医生还出医疗事故呢。
|
|
|
p******d
发帖数: 3737 | 31 那只小老鼠猛，画面很喜感~
【在 s**a 的大作中提到】
: 这个猛。。。
|
y***y
发帖数: 709 | 32 大家有见过mycoplasma污染之后是什么样子的吗？
我最近养的细胞在20X的显微镜下看，可以看见medium里面浮着大量的黑色细小浮游物
可是细胞生长不受影响，把这些medium转入到管子中放到室温下几个星期都看不出来液
体变浑浊啥的
我老板也曾经提到过是不是mycoplasma污染，我们没有做过专业的测试。可我土办法试
了一下，就是用DAPI染色，看细胞膜上有没有荧光信号。按说如果是mycoplasma污染，
会有很多mycoplasma附在细胞膜上，我用DAPI染色之后应该会发出荧光信号，可是我的
细胞没有。我就下了没有mycoplasma的结论，认为那些细小黑色浮游物是细胞代谢的产
物。
可看到大家在这里说的，我现在心里也打鼓了。
有谁能说说被mycoplasma污染之后的细胞是啥样子的？
project
【在 p******d 的大作中提到】
: mycoplasm污染不是你的错，一般都是试剂带进来的，不用觉得内疚。所有现用的试剂
: 可能都要从新买过配过了。但是原来冻的细胞除非本来就有问题，要不然不太会在
: liqN2里面被污染的。从别人实验室要细胞本来就要担这个风险，我们实验室原来要别
: 人的细胞也发现了mycoplasm。这种事情不能怪你，大老板这一点应该心里有素。
: 你心理压力实在不用太大，实验室现在气氛不好，但是过去了大家就想通了。我第一个
: 轮转的实验室在我轮转的时候发生了核素污染，被罚了500块，然后就有美国人开玩笑
: 样说是我这个新手干的，我就懒得理他们。那个实验室每个人都天天做核素，凭什么因
: 为我是新手就怀疑我，我是女生又新手，小心程度比他们高多了。反正最后为了不做核
: 素，也没有留在这个实验室，但是这个老板当时还蛮想留我的。轮转的时候把project
: 做好一点，老板看工作量，别的都是小事。说不好听，好多实验室有了mycoplasm污染
|
j*****a
发帖数: 658 | 33 mycoplasma普通光学显微镜下看不到，体积<1uM。 你看到这个black dots很多实验室
都遇到过。
但现在对这究竟是事么没有定论。有人说是一种bacteria，有人说是parasite,有人说
是培养皿里的
一种培养皿里的氧化硅。但一般情况下不影响细胞生长，甚至pbs之类细洗，换几次培
养液就去掉了。
【在 y***y 的大作中提到】
: 大家有见过mycoplasma污染之后是什么样子的吗？
: 我最近养的细胞在20X的显微镜下看，可以看见medium里面浮着大量的黑色细小浮游物
: 可是细胞生长不受影响，把这些medium转入到管子中放到室温下几个星期都看不出来液
: 体变浑浊啥的
: 我老板也曾经提到过是不是mycoplasma污染，我们没有做过专业的测试。可我土办法试
: 了一下，就是用DAPI染色，看细胞膜上有没有荧光信号。按说如果是mycoplasma污染，
: 会有很多mycoplasma附在细胞膜上，我用DAPI染色之后应该会发出荧光信号，可是我的
: 细胞没有。我就下了没有mycoplasma的结论，认为那些细小黑色浮游物是细胞代谢的产
: 物。
: 可看到大家在这里说的，我现在心里也打鼓了。
|
s******y
发帖数: 28562 | 34 直接用PCR kit 来做，用mycoplasma specific primers， 更灵敏也更直观
【在 y***y 的大作中提到】
: 大家有见过mycoplasma污染之后是什么样子的吗？
: 我最近养的细胞在20X的显微镜下看，可以看见medium里面浮着大量的黑色细小浮游物
: 可是细胞生长不受影响，把这些medium转入到管子中放到室温下几个星期都看不出来液
: 体变浑浊啥的
: 我老板也曾经提到过是不是mycoplasma污染，我们没有做过专业的测试。可我土办法试
: 了一下，就是用DAPI染色，看细胞膜上有没有荧光信号。按说如果是mycoplasma污染，
: 会有很多mycoplasma附在细胞膜上，我用DAPI染色之后应该会发出荧光信号，可是我的
: 细胞没有。我就下了没有mycoplasma的结论，认为那些细小黑色浮游物是细胞代谢的产
: 物。
: 可看到大家在这里说的，我现在心里也打鼓了。
|
v***a
发帖数: 1242 | 35 哈哈 我们lab也有人跑掉rat（不过还是只有一点点大的小rat） 她大声尖叫 把我们都
吓着了 后来老板果断出场 抓住了小rat
【在 p******d 的大作中提到】
: 那只小老鼠猛，画面很喜感~
|
p******d
发帖数: 3737 | 36 可以用PCR，我们用过sigma的stain kit也可以。你说的那个有点想是原来说的黑胶虫
？？？不知
道，我觉得这个东西就像个myth，反正就听说过，但是说不清是啥。我见过的
mycoplasma污染主要是
细胞长的慢，然后出现胞浆里面的空泡状的结构，有些细胞就变圆了。
http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/Datasheet/myc1dat.Par.
0001.File.tmp/myc1dat.pdf
【在 y***y 的大作中提到】
: 大家有见过mycoplasma污染之后是什么样子的吗？
: 我最近养的细胞在20X的显微镜下看，可以看见medium里面浮着大量的黑色细小浮游物
: 可是细胞生长不受影响，把这些medium转入到管子中放到室温下几个星期都看不出来液
: 体变浑浊啥的
: 我老板也曾经提到过是不是mycoplasma污染，我们没有做过专业的测试。可我土办法试
: 了一下，就是用DAPI染色，看细胞膜上有没有荧光信号。按说如果是mycoplasma污染，
: 会有很多mycoplasma附在细胞膜上，我用DAPI染色之后应该会发出荧光信号，可是我的
: 细胞没有。我就下了没有mycoplasma的结论，认为那些细小黑色浮游物是细胞代谢的产
: 物。
: 可看到大家在这里说的，我现在心里也打鼓了。
|
b*****l
发帖数: 9499 | 37 哈哈
【在 v***a 的大作中提到】
: 哈哈 我们lab也有人跑掉rat（不过还是只有一点点大的小rat） 她大声尖叫 把我们都
: 吓着了 后来老板果断出场 抓住了小rat
|
m*********n
发帖数: 215 | 38 额这个“空泡”看的我心惊肉跳。。。怎么感觉今天看到我养的细胞里面有空泡状捏。
。。。。。
【在 p******d 的大作中提到】
: 可以用PCR，我们用过sigma的stain kit也可以。你说的那个有点想是原来说的黑胶虫
: ？？？不知
: 道，我觉得这个东西就像个myth，反正就听说过，但是说不清是啥。我见过的
: mycoplasma污染主要是
: 细胞长的慢，然后出现胞浆里面的空泡状的结构，有些细胞就变圆了。
: http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/Datasheet/myc1dat.Par.
: 0001.File.tmp/myc1dat.pdf
|
