v****a
发帖数: 121 | 1 想请教请教。
我在做这个，老是得不到连接的质粒，谢谢。 |
e****l
发帖数: 204 | 2 LIC的效率应该挺高的
但做 LIC 时，不能用最新的 Phusion 等酶来 PCR insert，因为那会产生很多能连接
到载体里的引物二聚体。
【在 v****a 的大作中提到】
: 想请教请教。
: 我在做这个，老是得不到连接的质粒，谢谢。
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z****g
发帖数: 3340 | 3 你这个是什么原理？ 我现在是大片段连不上（>4kb)，小的没问题。
【在 e****l 的大作中提到】
: LIC的效率应该挺高的
: 但做 LIC 时，不能用最新的 Phusion 等酶来 PCR insert，因为那会产生很多能连接
: 到载体里的引物二聚体。
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e****l
发帖数: 204 | 4 我们的反应主要依靠引物上的序列产生长的单链 overhang
而引物二聚体也能产生相同的 overhang，会引入假阳性
大片段我们也较难连上
【在 z****g 的大作中提到】
: 你这个是什么原理？ 我现在是大片段连不上（>4kb)，小的没问题。
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X***n
发帖数: 366 | 5 LIC=SLIC?
If it doesn't work, you can try CPEC. :) |
