r*********n 发帖数: 13992 | 1 Mouse colon tissue,做了很多次了,有时候有信号,有时候没有,快被折磨疯掉了,
TNND,俺还用TSA boost呢......
看人家说的这个抗体(cell signaling)的)挺好用的阿,我做的这个咋就这么不稳定
呢。试了其他的apoptosis marker的抗体,例如Cleaved-PARP,也是没有什么信号。但
是我做别的抗体就没什么问题,结果还不错,就是不知道这个的问题到底出在哪里,烦
死人阿。
TUNEL做完了,老板非要其他一个marker作比较,唉,童鞋们你们谁做过这个?能不能
说一下关键步骤在哪里啊? |
j****g 发帖数: 406 | 2 用过这个抗体,在brain section上,信号很强。抱歉没有什么有用的信息。
【在 r*********n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Mouse colon tissue,做了很多次了,有时候有信号,有时候没有,快被折磨疯掉了, : TNND,俺还用TSA boost呢...... : 看人家说的这个抗体(cell signaling)的)挺好用的阿,我做的这个咋就这么不稳定 : 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体,例如Cleaved-PARP,也是没有什么信号。但 : 是我做别的抗体就没什么问题,结果还不错,就是不知道这个的问题到底出在哪里,烦 : 死人阿。 : TUNEL做完了,老板非要其他一个marker作比较,唉,童鞋们你们谁做过这个?能不能 : 说一下关键步骤在哪里啊?
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r*****m 发帖数: 231 | |
r*********n 发帖数: 13992 | 4 谢谢。俺用过1:100和1:200,明天试一试1:50看看。
【在 r*****m 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用到1:50就consistent了。。。
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n********k 发帖数: 2818 | 5 follow a brdu staining protocol may help
【在 r*********n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Mouse colon tissue,做了很多次了,有时候有信号,有时候没有,快被折磨疯掉了, : TNND,俺还用TSA boost呢...... : 看人家说的这个抗体(cell signaling)的)挺好用的阿,我做的这个咋就这么不稳定 : 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体,例如Cleaved-PARP,也是没有什么信号。但 : 是我做别的抗体就没什么问题,结果还不错,就是不知道这个的问题到底出在哪里,烦 : 死人阿。 : TUNEL做完了,老板非要其他一个marker作比较,唉,童鞋们你们谁做过这个?能不能 : 说一下关键步骤在哪里啊?
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h*****o 发帖数: 342 | 6 这个抗体做western不错,错IHC的话不容易。我在大脑切片上,好像所有的神经细胞都
染了,我感觉可能uncleaved的也染了
【在 r*********n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Mouse colon tissue,做了很多次了,有时候有信号,有时候没有,快被折磨疯掉了, : TNND,俺还用TSA boost呢...... : 看人家说的这个抗体(cell signaling)的)挺好用的阿,我做的这个咋就这么不稳定 : 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体,例如Cleaved-PARP,也是没有什么信号。但 : 是我做别的抗体就没什么问题,结果还不错,就是不知道这个的问题到底出在哪里,烦 : 死人阿。 : TUNEL做完了,老板非要其他一个marker作比较,唉,童鞋们你们谁做过这个?能不能 : 说一下关键步骤在哪里啊?
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i*********0 发帖数: 915 | 7 一个小问题,这个 Cleaved caspase-3 是看p53 independent apoptosis么?
我记得在一片paper上看过,现在忘记了. |
F**********e 发帖数: 158 | 8 这个不是你的问题也不是抗体的问题, 本来在mouse colon tissue 里caspase-3 阳
性的细胞就很少的, 基本上很难看到
偶尔有一两个。 如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些
但是也很少
这个抗体我也在用 1:200
就很好了
【在 r*********n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Mouse colon tissue,做了很多次了,有时候有信号,有时候没有,快被折磨疯掉了, : TNND,俺还用TSA boost呢...... : 看人家说的这个抗体(cell signaling)的)挺好用的阿,我做的这个咋就这么不稳定 : 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体,例如Cleaved-PARP,也是没有什么信号。但 : 是我做别的抗体就没什么问题,结果还不错,就是不知道这个的问题到底出在哪里,烦 : 死人阿。 : TUNEL做完了,老板非要其他一个marker作比较,唉,童鞋们你们谁做过这个?能不能 : 说一下关键步骤在哪里啊?
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r*********n 发帖数: 13992 | 9 很专业,赞。
不过我的mouse是处理过的,诱导了colitis,所以有大量的Inflammation和dysplasia
,情况应该跟没有处理的组织不同。tunel结果显示还是有不少apoptosis的(虽然不少
因素可以影响tunel的结果)。
【在 F**********e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这个不是你的问题也不是抗体的问题, 本来在mouse colon tissue 里caspase-3 阳 : 性的细胞就很少的, 基本上很难看到 : 偶尔有一两个。 如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些 : 但是也很少 : 这个抗体我也在用 1:200 : 就很好了
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