r*********n
发帖数: 13992 | 1 Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
TNND，俺还用TSA boost呢......
看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
死人阿。
TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
说一下关键步骤在哪里啊？ |
j****g
发帖数: 406 | 2 用过这个抗体，在brain section上，信号很强。抱歉没有什么有用的信息。
【在 r*********n 的大作中提到】
: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？
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r*****m
发帖数: 231 | |
r*********n
发帖数: 13992 | 4 谢谢。俺用过1：100和1：200，明天试一试1：50看看。
【在 r*****m 的大作中提到】
: 用到1：50就consistent了。。。
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n********k
发帖数: 2818 | 5 follow a brdu staining protocol may help
【在 r*********n 的大作中提到】
: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？
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h*****o
发帖数: 342 | 6 这个抗体做western不错，错IHC的话不容易。我在大脑切片上，好像所有的神经细胞都
染了，我感觉可能uncleaved的也染了
【在 r*********n 的大作中提到】
: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？
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i*********0
发帖数: 915 | 7 一个小问题,这个 Cleaved caspase-3 是看p53 independent apoptosis么?
我记得在一片paper上看过,现在忘记了. |
F**********e
发帖数: 158 | 8 这个不是你的问题也不是抗体的问题， 本来在mouse colon tissue 里caspase－3 阳
性的细胞就很少的， 基本上很难看到
偶尔有一两个。 如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些
但是也很少
这个抗体我也在用 1：200
就很好了
【在 r*********n 的大作中提到】
: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？
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r*********n
发帖数: 13992 | 9 很专业，赞。
不过我的mouse是处理过的，诱导了colitis，所以有大量的Inflammation和dysplasia
，情况应该跟没有处理的组织不同。tunel结果显示还是有不少apoptosis的（虽然不少
因素可以影响tunel的结果）。
【在 F**********e 的大作中提到】
: 这个不是你的问题也不是抗体的问题， 本来在mouse colon tissue 里caspase－3 阳
: 性的细胞就很少的， 基本上很难看到
: 偶尔有一两个。 如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些
: 但是也很少
: 这个抗体我也在用 1：200
: 就很好了
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