a*****s
发帖数: 838 | 1 用这个stock buffer按照常用的配方来配胶的话，bis-acrylamide的浓度要比平时高10
倍。不知道这个10倍高的浓度是什么原理？另外配出来的胶，颜色瓷白瓷白的（
resolving gel)。硬度没怎么增加，还是软的。就是操作起来不太爽。另外加上正极池
里加了sodium deoxycholate，跑胶的时候有一条白线跟着dye的线在一起。
还有一个问题是，不容易控制跑胶的样品速度。有的lane快，有的lane慢。郁闷。
（这个是invitrogen的tris-glycine胶的配方，用来跑native gel的）
有经验的吗？谢谢~ |
s******9
发帖数: 283 | 2 估计你理解错了。30%可能是T%值，8%是C%值（crosslinker的ratio，而不是绝对浓度
）。
C%=5%时，gel的pore size最小，分子筛效应最大。这就是为什么跑蛋白一般用5%的交
联剂。 |
k**e
发帖数: 2728 | 3 哦。。。这个说法很有道理。。
怎么找对应C％和T％的acrylamide / bisacrylamide的值？
【在 s******9 的大作中提到】
: 估计你理解错了。30%可能是T%值，8%是C%值（crosslinker的ratio，而不是绝对浓度
: ）。
: C%=5%时，gel的pore size最小，分子筛效应最大。这就是为什么跑蛋白一般用5%的交
: 联剂。
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a*****s
发帖数: 838 | 4 看了下，好像没看错。现在附个图在这里，请看看吧。我也搞不清楚了。跑native gel
的人也不多。都没地儿问去。这个图里的配方是final working concentration, stock
如果和30% acrylamide 配的话，就是8%的bis-acrylamide。抑或是我理解的问题？
【在 s******9 的大作中提到】
: 估计你理解错了。30%可能是T%值，8%是C%值（crosslinker的ratio，而不是绝对浓度
: ）。
: C%=5%时，gel的pore size最小，分子筛效应最大。这就是为什么跑蛋白一般用5%的交
: 联剂。
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s******9
发帖数: 283 | 5 For your case: 30% stock solution
30g Acrylamide
30x2.6% = 0.78g Bis
in 100 mL final volume |
a*****s
发帖数: 838 | 6 非常非常感谢。谢谢。就是很奇怪这个表格怎么是这么计算的。
【在 s******9 的大作中提到】
: For your case: 30% stock solution
: 30g Acrylamide
: 30x2.6% = 0.78g Bis
: in 100 mL final volume
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