C**S
发帖数: 522 | 1 需要在老鼠出生后诱导KO，前一阵用tamoxifen 1mg连续5天，没有检测到KO。有人说要
用4OH-tamoxifen。会是这种原因吗？
还有，我查了一下sigma，有两种4OHT，一种50mg，$190;一种25mg，$380。哪种效果好
？ |
G********e
发帖数: 528 | 2 不会
TAM就可以，如果对老鼠
cell culture的话用OHT
【在 C**S 的大作中提到】
: 需要在老鼠出生后诱导KO，前一阵用tamoxifen 1mg连续5天，没有检测到KO。有人说要
: 用4OH-tamoxifen。会是这种原因吗？
: 还有，我查了一下sigma，有两种4OHT，一种50mg，$190;一种25mg，$380。哪种效果好
: ？
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l**********n
发帖数: 240 | 3 用tamoxifen连续5天后，可以多等几天再测蛋白。有的蛋白半衰期很长。
【在 C**S 的大作中提到】
: 需要在老鼠出生后诱导KO，前一阵用tamoxifen 1mg连续5天，没有检测到KO。有人说要
: 用4OH-tamoxifen。会是这种原因吗？
: 还有，我查了一下sigma，有两种4OHT，一种50mg，$190;一种25mg，$380。哪种效果好
: ？
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i*********0
发帖数: 915 | 4 tamoxifen
这个东西可以在体内被代谢一下，变成4-oht吧。 |
C**S
发帖数: 522 | 5 Thanks. I did wait for 5 days after the last injection.
【在 l**********n 的大作中提到】
: 用tamoxifen连续5天后，可以多等几天再测蛋白。有的蛋白半衰期很长。
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C**S
发帖数: 522 | 6 Another question: Do I have to use female mice? |
D*a
发帖数: 6830 | 7 不用非用母的吧，公的母的都会被KO的
你试试加量呢？
我们实验室有人做的，量具体不知道，是早晚各一次持续五天，他们第一次摸的时候弄
了三种不同浓度不同长度的protocol来实验。
另外你的cre真的管用吗？我们隔壁实验室也用cre在另一个器官做ko，我们用的是同一
只flox的老鼠，他们的就效率很低 |
G********e
发帖数: 528 | 8 顺便请教，你的蛋白去到多干净，或者genotypeing？
【在 l**********n 的大作中提到】
: 用tamoxifen连续5天后，可以多等几天再测蛋白。有的蛋白半衰期很长。
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S******9
发帖数: 2837 | 9 老鼠诱导用tamoxifem是work的。
但是不同的cre不一样的，有些cre需要gastric lavage才行，大多数是IP。
我做过有ve-cad Cre和Tie Cre无论用那种方法都没有work。我Tie Cre用过每天灌胃
1mg，连续3周也没work。文献有报道6周食物加Tamoxifen。
有几个系统剔除的cre，一般IP 10天， 每天1mg， 在3~4周开始，然后停药1周以后可
以用，老鼠剔除效果在95~99%之间。 感觉IP 5天的，剔除率大概在92~95%。这个都是
根据不同的target定的。
再者，有些cre对于不同组织剔除IP的老鼠年龄也有很大关系，有些脑血管内皮剔除需
要在新生鼠24小时内IP一次，这个时候就需要用4-OH，估计是新生鼠肝脏功能还没有成
鼠成熟，对于Tamoxifen的代谢利用不足吧。 |
C**S
发帖数: 522 | 10 The one I used is ve-cad cre ...... Did you get it from UCLA?
【在 S******9 的大作中提到】
: 老鼠诱导用tamoxifem是work的。
: 但是不同的cre不一样的，有些cre需要gastric lavage才行，大多数是IP。
: 我做过有ve-cad Cre和Tie Cre无论用那种方法都没有work。我Tie Cre用过每天灌胃
: 1mg，连续3周也没work。文献有报道6周食物加Tamoxifen。
: 有几个系统剔除的cre，一般IP 10天， 每天1mg， 在3~4周开始，然后停药1周以后可
: 以用，老鼠剔除效果在95~99%之间。 感觉IP 5天的，剔除率大概在92~95%。这个都是
: 根据不同的target定的。
: 再者，有些cre对于不同组织剔除IP的老鼠年龄也有很大关系，有些脑血管内皮剔除需
: 要在新生鼠24小时内IP一次，这个时候就需要用4-OH，估计是新生鼠肝脏功能还没有成
: 鼠成熟，对于Tamoxifen的代谢利用不足吧。
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S******9
发帖数: 2837 | |
D***y
发帖数: 693 | 12 I used oral gavage (0.8 mg/10g body weight). after 7 days, I can detect it
using rosa26 reporter mice.
【在 C**S 的大作中提到】
: 需要在老鼠出生后诱导KO，前一阵用tamoxifen 1mg连续5天，没有检测到KO。有人说要
: 用4OH-tamoxifen。会是这种原因吗？
: 还有，我查了一下sigma，有两种4OHT，一种50mg，$190;一种25mg，$380。哪种效果好
: ？
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S******9
发帖数: 2837 | 13 Rosa26 work不等于在你的target上work。
it
【在 D***y 的大作中提到】
: I used oral gavage (0.8 mg/10g body weight). after 7 days, I can detect it
: using rosa26 reporter mice.
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C**S
发帖数: 522 | 14 谢谢，是同一种。
请问你们最后换到哪一种cre了？
【在 S******9 的大作中提到】
: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17072878
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s********l
发帖数: 58 | 15 问个弱弱的问题，tamoxifen和4OH-tamoxifen结合雌激素受体，会不会有非特异效应？
比如说，它的雌激素拮抗作用会否引起老鼠骨质疏松？ |
