H*g
发帖数: 2333 | 1 准备用纯化的his-tag蛋白做EMSA，不知道imidazole会不会对EMSA有很大影响。
请教大家，需要事先脱盐除掉imidazole(300mM)吗？不知道要不要老板去买desalting
的柱子。
Thanks！ |
C*******e
发帖数: 4348 | 2 不能透析去除么？
desalting
【在 H*g 的大作中提到】
: 准备用纯化的his-tag蛋白做EMSA，不知道imidazole会不会对EMSA有很大影响。
: 请教大家，需要事先脱盐除掉imidazole(300mM)吗？不知道要不要老板去买desalting
: 的柱子。
: Thanks！
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m**z
发帖数: 787 | 3 dialysis不就行了，干吗非要desalting column呢
desalting
【在 H*g 的大作中提到】
: 准备用纯化的his-tag蛋白做EMSA，不知道imidazole会不会对EMSA有很大影响。
: 请教大家，需要事先脱盐除掉imidazole(300mM)吗？不知道要不要老板去买desalting
: 的柱子。
: Thanks！
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I*****y
发帖数: 6402 | 4 在我以前用过的系统里面，300 mM imidazole影响EMSA的binding, oligomerization
desalting
【在 H*g 的大作中提到】
: 准备用纯化的his-tag蛋白做EMSA，不知道imidazole会不会对EMSA有很大影响。
: 请教大家，需要事先脱盐除掉imidazole(300mM)吗？不知道要不要老板去买desalting
: 的柱子。
: Thanks！
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H*g
发帖数: 2333 | 5 Thanks for all the feedbacks!
Does Dialysis take too much time? I am just too lazy, since desalting column
seems easier. |
a********n
发帖数: 844 | 6 建议拿到蛋白后直接做个EMSA试一试能不能。dialysis几步下来蛋白损失，活性可能受
影响，如果EMSA不被imidazole影响，就可以省去dialysis这个麻烦。 |
K****a
发帖数: 161 | 7 刚做的，直接透析就行了，4度透析两次，每次1个小时，搞定。 |
