C****1
发帖数: 21 | 1 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验，tail vein注射完evans blue以后1小
时，
左心室灌注PBS，然后取脑组织，匀浆后测定。
试了几次都没有结果，有几个问题请教：
1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆，然后离心，取上清测定。
脑组织先在PBS里面匀浆，然后离心； 取上清液500ul，加入50%TCA 500ul，
incubate at 4
度 O/N，次日离心，取上清液测定。
哪一种方法好？
2. 测定的时候，我们试了波长610，615，620，感觉结果都很低。
3. 改用fluorencens测定，用ethanol稀释3倍，比较原液测定，浓度反倒高了。标准曲
线是用
evans blue + TCA +ethanol配置后进行等比例稀释做的吗？
请做过的各位版友帮助，谢谢
再次祝福新年快乐 |
w*********i
发帖数: 7 | 2 你好，我对你的BBB的研究挺感兴趣，目前我做一些结核性脑膜炎与血脑通透性的研究
，我想如果可以的话，能互相介绍下自己的情况吧，希望能够产生一些合作。
Email:1*******[email protected] |
C****1
发帖数: 21 | |
V******N
发帖数: 293 | 4 1, 你只说了一种方法，为什么问哪一种方法好？我们不是在4度过夜的，我们是在高温
度下过夜的。 |
i****s
发帖数: 729 | 5 我没看懂你要测什么
【在 C****1 的大作中提到】
: 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验，tail vein注射完evans blue以后1小
: 时，
: 左心室灌注PBS，然后取脑组织，匀浆后测定。
: 试了几次都没有结果，有几个问题请教：
: 1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆，然后离心，取上清测定。
: 脑组织先在PBS里面匀浆，然后离心； 取上清液500ul，加入50%TCA 500ul，
: incubate at 4
: 度 O/N，次日离心，取上清液测定。
: 哪一种方法好？
: 2. 测定的时候，我们试了波长610，615，620，感觉结果都很低。
|
c**a
发帖数: 67 | 6 EB效果不好，会结合血清蛋白。用620波长测，具体参考以下文章：
Blood–brain barrier changes and cell invasion differ between therapeutic
immune clearance of neurotrophic virus and CNS autoimmunity |
