C****1 发帖数: 21 | 1 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验,tail vein注射完evans blue以后1小
时,
左心室灌注PBS,然后取脑组织,匀浆后测定。
试了几次都没有结果,有几个问题请教:
1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆,然后离心,取上清测定。
脑组织先在PBS里面匀浆,然后离心; 取上清液500ul,加入50%TCA 500ul,
incubate at 4
度 O/N,次日离心,取上清液测定。
哪一种方法好?
2. 测定的时候,我们试了波长610,615,620,感觉结果都很低。
3. 改用fluorencens测定,用ethanol稀释3倍,比较原液测定,浓度反倒高了。标准曲
线是用
evans blue + TCA +ethanol配置后进行等比例稀释做的吗?
请做过的各位版友帮助,谢谢
再次祝福新年快乐 |
w*********i 发帖数: 7 | 2 你好,我对你的BBB的研究挺感兴趣,目前我做一些结核性脑膜炎与血脑通透性的研究
,我想如果可以的话,能互相介绍下自己的情况吧,希望能够产生一些合作。
Email:1*******[email protected] |
C****1 发帖数: 21 | |
V******N 发帖数: 293 | 4 1, 你只说了一种方法,为什么问哪一种方法好?我们不是在4度过夜的,我们是在高温
度下过夜的。 |
i****s 发帖数: 729 | 5 我没看懂你要测什么
【在 C****1 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验,tail vein注射完evans blue以后1小 : 时, : 左心室灌注PBS,然后取脑组织,匀浆后测定。 : 试了几次都没有结果,有几个问题请教: : 1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆,然后离心,取上清测定。 : 脑组织先在PBS里面匀浆,然后离心; 取上清液500ul,加入50%TCA 500ul, : incubate at 4 : 度 O/N,次日离心,取上清液测定。 : 哪一种方法好? : 2. 测定的时候,我们试了波长610,615,620,感觉结果都很低。
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c**a 发帖数: 67 | 6 EB效果不好,会结合血清蛋白。用620波长测,具体参考以下文章:
Blood–brain barrier changes and cell invasion differ between therapeutic
immune clearance of neurotrophic virus and CNS autoimmunity |