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Biology版 - 求教:Dot-blot的protocal 或者降低背景噪音的方法
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l********g
发帖数: 26
1
用DNA做Dot blot,之前做的时候一直没啥问题,
忽然从某天开始,曝光的背景噪音高的无法接受,黑乎乎的。
buffer用的1XPBST。更换了所有的试剂和膜都没起色。
有没有大牛share一个好的Dot blot的protocal或者指点一下如何才能
降低背景噪音?antibody我已经尽可能少的加了,不能再减了。
谢谢!
g*******f
发帖数: 427
2
在PBST里多加一点T试试,多洗几次,如果一片黑的话可能还是因为洗得不够。我觉得
这种方法本身就很 tricky ,如果让我审稿我一定会让用其它方法来验证 dotblot 的
结果
l********g
发帖数: 26
3
现在我用的Tween20浓度是0.1%, 搞到多高会洗得更干净同时不会影响结果?
我有其他的实验验证,但是dotblot比较直观啊

【在 g*******f 的大作中提到】
: 在PBST里多加一点T试试,多洗几次,如果一片黑的话可能还是因为洗得不够。我觉得
: 这种方法本身就很 tricky ,如果让我审稿我一定会让用其它方法来验证 dotblot 的
: 结果

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