如何改变质粒抗性 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 如何改变质粒抗性

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话题: pgex话题: 抗性话题: amp话题: 质粒话题: pet

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l*********1 发帖数: 351	1 用pgex－4t－1表达gst－tagged 融合蛋白。pgex是amp抗性的，现在想把amp改成 kanamycin抗性的质粒。是不是只需要剔除抗amp的TEM基因的orf片段，换成pet体系中的相关基因，保持原有 promoter即可？谢谢
s********n 发帖数: 2939	2 你可以查查看pGEX载体上的酶切位点，找到相应的酶切位点把bla切下来得到backbone ；再把KnR gene（包括promoter，RBS和terminator）从pET上切下来连接上即可，如果末端不匹配可能补平。

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