h*****G 发帖数: 113 | 1 小弟刚开始做stem cell,现在需要用siRNA 转进mouse stem cell 去knockdown基因。
试了roche的x-treme siRNA transfection kit, 效果不理想,几乎没有knock down
target 基因。
希望有经验的大侠推荐合适的试剂,使用的siRNA的量和注意事项。
thanks~~ |
r*****d 发帖数: 366 | 2 I used shRNA...
down
【在 h*****G 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 小弟刚开始做stem cell,现在需要用siRNA 转进mouse stem cell 去knockdown基因。 : 试了roche的x-treme siRNA transfection kit, 效果不理想,几乎没有knock down : target 基因。 : 希望有经验的大侠推荐合适的试剂,使用的siRNA的量和注意事项。 : thanks~~
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D******y 发帖数: 723 | 3 we use lenti-virus carrying shRNA
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【在 h*****G 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 小弟刚开始做stem cell,现在需要用siRNA 转进mouse stem cell 去knockdown基因。 : 试了roche的x-treme siRNA transfection kit, 效果不理想,几乎没有knock down : target 基因。 : 希望有经验的大侠推荐合适的试剂,使用的siRNA的量和注意事项。 : thanks~~
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B******o 发帖数: 496 | 4 具体是啥 stem cell? 查查文献别人用啥试剂做的transfection撒
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【在 h*****G 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 小弟刚开始做stem cell,现在需要用siRNA 转进mouse stem cell 去knockdown基因。 : 试了roche的x-treme siRNA transfection kit, 效果不理想,几乎没有knock down : target 基因。 : 希望有经验的大侠推荐合适的试剂,使用的siRNA的量和注意事项。 : thanks~~
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a******n 发帖数: 392 | 5 请问你们用的什么promoter? 如果要同时表达一个GFP,要怎么选择promoter? 谢谢了。
【在 D******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : we use lenti-virus carrying shRNA : : down
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D******y 发帖数: 723 | 6 we are using tet-on lentivirus
I have heard that you can co-transfer GFP construct in
【在 a******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 请问你们用的什么promoter? 如果要同时表达一个GFP,要怎么选择promoter? 谢谢了。
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M****7 发帖数: 214 | 7 有没有对照?positive ctrl and negative ctrl?
如果positive ctrl works, then the problem might possibly lie in the
target sequence you choose
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【在 h*****G 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 小弟刚开始做stem cell,现在需要用siRNA 转进mouse stem cell 去knockdown基因。 : 试了roche的x-treme siRNA transfection kit, 效果不理想,几乎没有knock down : target 基因。 : 希望有经验的大侠推荐合适的试剂,使用的siRNA的量和注意事项。 : thanks~~
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