求助，保存细胞裂解液的问题？ - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 求助，保存细胞裂解液的问题？

相关主题
● 求问限制内切酶该怎么拿？	● SDS-PAGE 样品求助
● 攒人品！分享PLASMID大提经验	● 关于从分行和未分化的3T3L1提取RNA
● -20度保存的抗体怎么带回国？ (转载)	● 请教从mouse tissue里提蛋白做Western
● 从肿瘤组织里提取的蛋白怎么保存？	● laemmli buffer裂解细胞超声煮过后，理论上不会再降解变化了吧？
● 抗体过期了还能用吗	● 请教关于蛋白质的酶活性研究
● western提蛋白的困惑：多次离心vortex会不会降解蛋白	● digest 100ug plasmid DNA 最小体积多少啊?
● 求助细胞膜蛋白的提取	● 蛋白反复解冻会造成什么问题
● 有没有什么技术是可以Screen 细胞膜上蛋白表达情况的	● 瞬转的细胞能在-80放几天吗?

相关话题的讨论汇总
话题: 裂解话题: 保存话题: 细胞话题: 甘油话题: 解冻

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

H***e 发帖数: 223	1 周末用french pressure裂解细胞之后不能马上测酶活，需要等下一周去别的实验室用超速离心机。我的问题是： 1. 我加等体积的50%甘油混合，然后保存在-80度冰箱可以么？如果这个方法不行，细胞裂解液该如何保存呢？ 2. 我关注的酶在细胞膜上，这样会有什么影响么？ 3. 下周我需要用的时候直接解冻还是如何操作? 谢谢您的解答，非常感激。
s******y 发帖数: 28562	2 不要加甘油，用液氮直接冷冻，然后再放冰箱。直接37度解冻加那么高浓度的甘油的话会改变膜蛋白构象【在 H***e 的大作中提到】 : 周末用french pressure裂解细胞之后不能马上测酶活，需要等下一周去别的实验室用 : 超速离心机。我的问题是： : 1. 我加等体积的50%甘油混合，然后保存在-80度冰箱可以么？如果这个方法不行，细 : 胞裂解液该如何保存呢？ : 2. 我关注的酶在细胞膜上，这样会有什么影响么？ : 3. 下周我需要用的时候直接解冻还是如何操作? : 谢谢您的解答，非常感激。
s*******e 发帖数: 1010	3 15-20%的甘油即可，50%太夸张了膜蛋白其实对冻融过程抵抗能力更强一些，但是我不太同意37度解冻，不知多少蛋白酶会happy的不得了，我一般自来水冲其实最好先低（1kG，取上清）后高（>50kG，取沉淀）把膜提出来再冻，干净得多

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 瞬转的细胞能在-80放几天吗?	● 抗体过期了还能用吗
● 一个用细胞裂解液做elisa的问题。	● western提蛋白的困惑：多次离心vortex会不会降解蛋白
● 关于HPLC上跑全细胞裂解液的问题	● 求助细胞膜蛋白的提取
● 请教有Paramecium的专家吗？	● 有没有什么技术是可以Screen 细胞膜上蛋白表达情况的
● 求问限制内切酶该怎么拿？	● SDS-PAGE 样品求助
● 攒人品！分享PLASMID大提经验	● 关于从分行和未分化的3T3L1提取RNA
● -20度保存的抗体怎么带回国？ (转载)	● 请教从mouse tissue里提蛋白做Western
● 从肿瘤组织里提取的蛋白怎么保存？	● laemmli buffer裂解细胞超声煮过后，理论上不会再降解变化了吧？

相关话题的讨论汇总
话题: 裂解话题: 保存话题: 细胞话题: 甘油话题: 解冻

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)