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1
(共1页)
H***e
发帖数: 223
1
周末用french pressure裂解细胞之后不能马上测酶活,需要等下一周去别的实验室用
超速离心机。我的问题是:
1. 我加等体积的50%甘油混合,然后保存在-80度冰箱可以么?如果这个方法不行,细
胞裂解液该如何保存呢?
2. 我关注的酶在细胞膜上,这样会有什么影响么?
3. 下周我需要用的时候直接解冻还是如何操作?
谢谢您的解答,非常感激。
s******y
发帖数: 28562
2
不要加甘油,用液氮直接冷冻,然后再放冰箱。
直接37度解冻
加那么高浓度的甘油的话会改变膜蛋白构象
【在 H***e 的大作中提到】
: 周末用french pressure裂解细胞之后不能马上测酶活,需要等下一周去别的实验室用
: 超速离心机。我的问题是:
: 1. 我加等体积的50%甘油混合,然后保存在-80度冰箱可以么?如果这个方法不行,细
: 胞裂解液该如何保存呢?
: 2. 我关注的酶在细胞膜上,这样会有什么影响么?
: 3. 下周我需要用的时候直接解冻还是如何操作?
: 谢谢您的解答,非常感激。
s*******e
发帖数: 1010
3
15-20%的甘油即可,50%太夸张了
膜蛋白其实对冻融过程抵抗能力更强一些,但是我不太同意37度解冻,不知多少蛋白酶
会happy的不得了,我一般自来水冲
其实最好先低(1kG,取上清)后高(>50kG,取沉淀)把膜提出来再冻,干净得多
1
(共1页)
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