z****u
发帖数: 1007 | 1 刚进了个TetO-H2BGFP transgenic 耗子。文献里面给出的primer不能检测difference b/w
homo- or heterogenic transgenic alleles. 咋办？ |
l******g
发帖数: 1623 | 2 需要用real time PCR
/w
【在 z****u 的大作中提到】
: 刚进了个TetO-H2BGFP transgenic 耗子。文献里面给出的primer不能检测difference b/w
: homo- or heterogenic transgenic alleles. 咋办？
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z****u
发帖数: 1007 | 3 可行吗？因为理论上讲homo- and heterogenic transgenic 只差一个copy, 那在real
time pcr 上面只会反映出critical cycle number difference by one. 这可不太准确
阿。
【在 l******g 的大作中提到】
: 需要用real time PCR
:
: /w
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h********n
发帖数: 4079 | 4 get sequence of the chromasome of the transgene and design new primers |
z****u
发帖数: 1007 | 5 这才是难点阿。构建这个strain的人都不知道transgene的位置。
能否用reverse PCR通过construct向外扩增出两端的序列。没做过这种pcr
【在 h********n 的大作中提到】
: get sequence of the chromasome of the transgene and design new primers
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l******g
发帖数: 1623 | 6 我们就是用这方法鉴定transgene的copy number.
随笔google了一下,这地方也用:
http://catalog.takara-bio.co.jp/en/product/tech_info_detail2.as
real
【在 z****u 的大作中提到】
: 可行吗？因为理论上讲homo- and heterogenic transgenic 只差一个copy, 那在real
: time pcr 上面只会反映出critical cycle number difference by one. 这可不太准确
: 阿。
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z****u
发帖数: 1007 | 7 awesome!多谢了！
【在 l******g 的大作中提到】
: 我们就是用这方法鉴定transgene的copy number.
: 随笔google了一下,这地方也用:
: http://catalog.takara-bio.co.jp/en/product/tech_info_detail2.as
:
: real
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