v***a
发帖数: 1242 | 1 做免疫共沉淀反应后跑胶，用的是ECL法曝光（用了enhanced ECL），首次曝光的结果
和预期的非常一致，条带的趋势都是先增后减（两个独立的实验）；后来我调整了
曝光时间，然后出来的就不是了，一个是一直减少；一个是不变再突然增加。
以前也遇到过一次类似的情况，也是做免疫共沉淀实验，也用了enhanced ECL，最初曝
光和等一会再曝光的结果正好相反。
大家碰到过这样的情况吗？该相信最早的曝光结果还是曝光多次后的结果？谢谢！ |
s******u
发帖数: 81 | 2 用了enhanced ECL，信号跳跃性很大，试试不加Enhanced，长时间regular曝光。
【在 v***a 的大作中提到】
: 做免疫共沉淀反应后跑胶，用的是ECL法曝光（用了enhanced ECL），首次曝光的结果
: 和预期的非常一致，条带的趋势都是先增后减（两个独立的实验）；后来我调整了
: 曝光时间，然后出来的就不是了，一个是一直减少；一个是不变再突然增加。
: 以前也遇到过一次类似的情况，也是做免疫共沉淀实验，也用了enhanced ECL，最初曝
: 光和等一会再曝光的结果正好相反。
: 大家碰到过这样的情况吗？该相信最早的曝光结果还是曝光多次后的结果？谢谢！
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v***a
发帖数: 1242 | 3 谢谢！
【在 s******u 的大作中提到】
: 用了enhanced ECL，信号跳跃性很大，试试不加Enhanced，长时间regular曝光。
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m*********e
发帖数: 378 | 4 ECL 就是enhanced chemiluminesence , lz用的是enhanced ECL? |
m*********e
发帖数: 378 | 5 跳跃性大是怎么回事呢？能展开说说吗 谢谢
【在 s******u 的大作中提到】
: 用了enhanced ECL，信号跳跃性很大，试试不加Enhanced，长时间regular曝光。
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s******n
发帖数: 63 | 6 嗯，这个问题我也疑惑过，实验室一个很牛的大师兄说，以第一次曝光的结果为准，并
且最好第一次曝光时background设置成0，曝光时间短一些。
【在 v***a 的大作中提到】
: 做免疫共沉淀反应后跑胶，用的是ECL法曝光（用了enhanced ECL），首次曝光的结果
: 和预期的非常一致，条带的趋势都是先增后减（两个独立的实验）；后来我调整了
: 曝光时间，然后出来的就不是了，一个是一直减少；一个是不变再突然增加。
: 以前也遇到过一次类似的情况，也是做免疫共沉淀实验，也用了enhanced ECL，最初曝
: 光和等一会再曝光的结果正好相反。
: 大家碰到过这样的情况吗？该相信最早的曝光结果还是曝光多次后的结果？谢谢！
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A******y
发帖数: 2041 | 7 Wash and reblot with 2nd ab, some 2nd ab is not that stable. Are you also
using film or camera? Personally I beleive ECL should always use camera
because the linearity of ECL and film combo range is narrow. |
v***a
发帖数: 1242 | 8 Thank you! I use Fuji Luminescent Image Analyzer
【在 A******y 的大作中提到】
: Wash and reblot with 2nd ab, some 2nd ab is not that stable. Are you also
: using film or camera? Personally I beleive ECL should always use camera
: because the linearity of ECL and film combo range is narrow.
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v***a
发帖数: 1242 | 9 用的reagent是可以enhance signal的那种
【在 m*********e 的大作中提到】
: ECL 就是enhanced chemiluminesence , lz用的是enhanced ECL?
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v***a
发帖数: 1242 | 10 是啊，这次实验结果我也倾向于第一次。但上一次后续的曝光更符合预测，而且我又做
了好几次，确认了这点。看来这次还得再重复。。。
【在 s******n 的大作中提到】
: 嗯，这个问题我也疑惑过，实验室一个很牛的大师兄说，以第一次曝光的结果为准，并
: 且最好第一次曝光时background设置成0，曝光时间短一些。
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s******u
发帖数: 81 | 11 有时候信号太强会导致荧光淬灭，所以看起来信号反而弱了。
【在 m*********e 的大作中提到】
: 跳跃性大是怎么回事呢？能展开说说吗 谢谢
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C*******e
发帖数: 4348 | 12 顶这个
【在 s******u 的大作中提到】
: 有时候信号太强会导致荧光淬灭，所以看起来信号反而弱了。
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