n**8
发帖数: 221 | 1 跟前面的那个同学类似， 我也准备用同位素做southern 和 northern。但是不会做这
么频繁。
因为之前从未接触过，所以心里还是有点紧张。 Roche有DIG标记做southern/northern
的kit，
可是身边的人都是用同位素， 说DIG不work， 不敏感。 想问问各位大侠， 有没有用
地高辛的， 这
个到底信号有多弱？什么情况下可以用dig， 什么情况必须同位素？
不甚感激！ |
s********r
发帖数: 312 | 2 用过roche的这个，还行。我是筛的ES targeting colony |
n**8
发帖数: 221 | |
s******y
发帖数: 28562 | 4 DIG 确实没有同位素那么敏感。而且用DIG做的发文章的时候常常会被
reviewer要求用其他方法重复。
但是，对于常规的筛选，DIG是可以的。
扫到了有用的数据再上同位素重复吧
northern
【在 n**8 的大作中提到】
: 跟前面的那个同学类似， 我也准备用同位素做southern 和 northern。但是不会做这
: 么频繁。
: 因为之前从未接触过，所以心里还是有点紧张。 Roche有DIG标记做southern/northern
: 的kit，
: 可是身边的人都是用同位素， 说DIG不work， 不敏感。 想问问各位大侠， 有没有用
: 地高辛的， 这
: 个到底信号有多弱？什么情况下可以用dig， 什么情况必须同位素？
: 不甚感激！
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s********n
发帖数: 2939 | 5 用荧光标记好像可以和同位素标记媲美，你可以查一下他们的灵敏度。 |
s********r
发帖数: 312 | 6 补充下，这个kit好像价格不便宜，最好还是PCR筛过一遍后，用southern验证。或者直
接不做southern，设计引物扩增两个homology arm接头的地方然后测序。 |
m******5
发帖数: 1383 | 7 我用这个遇到问题，你们是用色素显色还是用发光底物盖胶片
【在 s********r 的大作中提到】
: 用过roche的这个，还行。我是筛的ES targeting colony
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n**8
发帖数: 221 | 8 多谢建议，我们正在inject ES cells。 准备也是先PCR筛，然后用southern验证。
【在 s********r 的大作中提到】
: 补充下，这个kit好像价格不便宜，最好还是PCR筛过一遍后，用southern验证。或者直
: 接不做southern，设计引物扩增两个homology arm接头的地方然后测序。
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n**8
发帖数: 221 | 9 请问sharkliver 大侠，你是用的Dig-RNA probe 还是 Dig-DNA probe？
谢谢！ |
