y********8
发帖数: 23 | 1 我想找一个vector能够random insertion into yeast genome，类似于transposon一样
，但是插入位点最好没有序列特异性，因为我想做一个insertion mutation library，
并且vector上有合适的克隆位点，我要克隆一个cDNA进去。
不知道yeast中有没有这样的vector? 如果有， 能推荐一个么？ 太谢谢了!! | s********n
发帖数: 2939 | 2 没做过yeast的insertion，好奇的问transposon不能用在yeast么？ | O******e
发帖数: 4845 | 3 你想用这个来筛什么？不太明白用yeast来做insertional mutagenesis能做什么。
【在 y********8 的大作中提到】
: 我想找一个vector能够random insertion into yeast genome，类似于transposon一样
: ，但是插入位点最好没有序列特异性，因为我想做一个insertion mutation library，
: 并且vector上有合适的克隆位点，我要克隆一个cDNA进去。
: 不知道yeast中有没有这样的vector? 如果有， 能推荐一个么？ 太谢谢了!!
| w*******e
发帖数: 63 | 4 你读过snyder前些年的paper吗？
比如
Genes Dev. 1994 May 1;8(9):1087-105.
Large-scale analysis of gene expression, protein localization, and gene
disruption in Saccharomyces cerevisiae.
Burns N, Grimwade B, Ross-Macdonald PB, Choi EY, Finberg K, Roeder GS,
Snyder M.
Source
Department of Biology, Yale University, New Haven, Connecticut 06520-8103.
和
Genome Res. 2004 Oct;14(10A):1975-86.
Large-scale mutagenesis of the yeast genome using a Tn7-derived multipurpose
transposon.
Kumar A, Seringhaus M, Biery MC, Sarnovsky RJ, Umansky L, Piccirillo S,
Heidtman M, Cheung KH, Dobry CJ, Gerstein MB, Craig NL, Snyder M.
Source
Department of Molecular, Cellular, and Developmental Biology, Yale
University, New Haven, Connecticut 06520-8103, USA. a***[email protected]
总体来讲比较麻烦，相比于其他yeast genetics的操作
【在 y********8 的大作中提到】
: 我想找一个vector能够random insertion into yeast genome，类似于transposon一样
: ，但是插入位点最好没有序列特异性，因为我想做一个insertion mutation library，
: 并且vector上有合适的克隆位点，我要克隆一个cDNA进去。
: 不知道yeast中有没有这样的vector? 如果有， 能推荐一个么？ 太谢谢了!!
| w*******e
发帖数: 63 | 5 因为现在有gene deletion collection，总体来说用处不大了。但是有时候还是有用的
。他不是说了要加一段cDNA进去么，那至少可以identify unknown cis regulatory
elements
【在 O******e 的大作中提到】
: 你想用这个来筛什么？不太明白用yeast来做insertional mutagenesis能做什么。
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