E*C
发帖数: 1629 | 1 PE conjugated 的特异性抗体， 检测时，处理的细胞应该不表达相应抗原蛋白。
PE channel确实看不到细胞，但FITC channel，看得也太清楚了吧，如下图。
盼哪位高人给我讲解一下！多谢。 |
y****6
发帖数: 196 | |
E*C
发帖数: 1629 | 3 谢谢回复，问一句，细胞自身荧光会到什么强度吗？为啥我在PE下看不到自身荧光呢
【在 y****6 的大作中提到】
: autofluorescence?
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y****6
发帖数: 196 | 4 I am not an expert. But I guess autofluorescence depends on the ex/em
spectra, lower wavelength (blue/green) has higher autofluorescence.
【在 E*C 的大作中提到】
: 谢谢回复，问一句，细胞自身荧光会到什么强度吗？为啥我在PE下看不到自身荧光呢
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Z****9
发帖数: 738 | 5 如果在DAPI，GFP或者red channel中的两或者3道能看到信号，基本上就是auto
如果只在一道里看到，很有可能是信号
最科学的方法是用Lamda模式，看Em的spectrum和对应的FP的em对比
【在 E*C 的大作中提到】
: 谢谢回复，问一句，细胞自身荧光会到什么强度吗？为啥我在PE下看不到自身荧光呢
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E*C
发帖数: 1629 | 6 谢谢楼上俩位的回复。
我因为想用FITC标记另一个抗原，结果发现，没标记前就这么亮：（
等下次实验我看看是否是自发荧光。 |
