E*C 发帖数: 1629 | 1 PE conjugated 的特异性抗体, 检测时,处理的细胞应该不表达相应抗原蛋白。
PE channel确实看不到细胞,但FITC channel,看得也太清楚了吧,如下图。
盼哪位高人给我讲解一下!多谢。 |
y****6 发帖数: 196 | |
E*C 发帖数: 1629 | 3 谢谢回复,问一句,细胞自身荧光会到什么强度吗?为啥我在PE下看不到自身荧光呢
【在 y****6 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : autofluorescence?
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y****6 发帖数: 196 | 4 I am not an expert. But I guess autofluorescence depends on the ex/em
spectra, lower wavelength (blue/green) has higher autofluorescence.
【在 E*C 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 谢谢回复,问一句,细胞自身荧光会到什么强度吗?为啥我在PE下看不到自身荧光呢
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Z****9 发帖数: 738 | 5 如果在DAPI,GFP或者red channel中的两或者3道能看到信号,基本上就是auto
如果只在一道里看到,很有可能是信号
最科学的方法是用Lamda模式,看Em的spectrum和对应的FP的em对比
【在 E*C 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 谢谢回复,问一句,细胞自身荧光会到什么强度吗?为啥我在PE下看不到自身荧光呢
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E*C 发帖数: 1629 | 6 谢谢楼上俩位的回复。
我因为想用FITC标记另一个抗原,结果发现,没标记前就这么亮:(
等下次实验我看看是否是自发荧光。 |