g***s
发帖数: 30 | 1 我们的方法是：裂解buffer：RIPA ，裂解方法：磁珠快速震荡，破碎larva。然后离心
，加入SDS loading buffer.
结果western结果很奇怪，经常出现一部分样品western没有任何信号，另外一部分完全
正常的情况。跟抗体肯定没关系，因为我们用一些非常好用的如tubulin actin都试过
了。
各位有遇到过类似的问题吗？ 能给支支招吗 |
A****a
发帖数: 18 | 2 Larva里有很多蛋白酶，可能消化了你的目标蛋白。
【在 g***s 的大作中提到】
: 我们的方法是：裂解buffer：RIPA ，裂解方法：磁珠快速震荡，破碎larva。然后离心
: ，加入SDS loading buffer.
: 结果western结果很奇怪，经常出现一部分样品western没有任何信号，另外一部分完全
: 正常的情况。跟抗体肯定没关系，因为我们用一些非常好用的如tubulin actin都试过
: 了。
: 各位有遇到过类似的问题吗？ 能给支支招吗
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s******s
发帖数: 13035 | 3 试一下直接加SDS sample buffer, 然后用一次性塑料pestle倒腾个几下？
【在 g***s 的大作中提到】
: 我们的方法是：裂解buffer：RIPA ，裂解方法：磁珠快速震荡，破碎larva。然后离心
: ，加入SDS loading buffer.
: 结果western结果很奇怪，经常出现一部分样品western没有任何信号，另外一部分完全
: 正常的情况。跟抗体肯定没关系，因为我们用一些非常好用的如tubulin actin都试过
: 了。
: 各位有遇到过类似的问题吗？ 能给支支招吗
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s*********t
发帖数: 600 | 4 直接加SDS loading buffer 然后立刻煮
【在 s******s 的大作中提到】
: 试一下直接加SDS sample buffer, 然后用一次性塑料pestle倒腾个几下？
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s*******r
发帖数: 562 | 5 Larva or head of adult直接加sds loading buffer, 超声, 立刻煮 |
g***s
发帖数: 30 | 6 非常感谢，回头试试看
【在 s*******r 的大作中提到】
: Larva or head of adult直接加sds loading buffer, 超声, 立刻煮
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