目的片断如果含有多个连续A会不会PCR时候容易出错？ - Biology版

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 目的片断如果含有多个连续A会不会PCR时候容易出错？

相关主题
● PCR拉不出片断，求助！	● 在线等Error prone PCR的有效方法？
● clone求助，很特别的基因序列	● 求教基因组PCR
● 请问高GC含量的primer怎么做PCR？	● PCR产物缺了一段是什么原因？
● 各位给推荐几个High Fidelity PCR kit吧	● Methylation实验中PCR的问题
● 请教：5‘端高GC含量的PCR	● 求简单省钱的dna extraction protocol
● Mutagenesis 求助：请问如何插入一段 ~20bp的片段?	● 求助high GC content的real-time PCR
● ligation的问题	● 令人头疼的长引物PCR
● how to explain: high protein expression but undetectable mRNA	● 十万火急，real-time PCR, 样品没扩增曲线

相关话题的讨论汇总
话题: pcr话题: 多个话题: 连续

进入Biology版参与讨论

(共1页)

r*****t
发帖数: 4793

在扩一段promoter 中间含有多个连续A（19个）然后是GAAAGAAAGAAAA这样的
用的invitrogen platinum pfx
扩得片断测序后，发现总是在多个连续A后，有GAAA的丢失
而且测的几个克隆丢失的还不太一样
我现在不知道是测序的问题还是PCR的问题，不知道大家有没有这种情况？

s******y
发帖数: 28562

可能是二级结构的问题。
不妨加点DMSO or betaine 试试

【在 r*****t 的大作中提到】

: 在扩一段promoter 中间含有多个连续A（19个）然后是GAAAGAAAGAAAA这样的
: 用的invitrogen platinum pfx
: 扩得片断测序后，发现总是在多个连续A后，有GAAA的丢失
: 而且测的几个克隆丢失的还不太一样
: 我现在不知道是测序的问题还是PCR的问题，不知道大家有没有这种情况？

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 十万火急，real-time PCR, 样品没扩增曲线	● 请教：5‘端高GC含量的PCR
● 要做长引物pcr，大家有没有啥建议呀～～	● Mutagenesis 求助：请问如何插入一段 ~20bp的片段?
● site mutagenesis遇到麻烦事了，	● ligation的问题
● 小白求大侠们指点3‘RACE	● how to explain: high protein expression but undetectable mRNA
● PCR拉不出片断，求助！	● 在线等Error prone PCR的有效方法？
● clone求助，很特别的基因序列	● 求教基因组PCR
● 请问高GC含量的primer怎么做PCR？	● PCR产物缺了一段是什么原因？
● 各位给推荐几个High Fidelity PCR kit吧	● Methylation实验中PCR的问题

相关话题的讨论汇总
话题: pcr话题: 多个话题: 连续

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

boards

未名新帖统计// 7月16日

历史上的今天