由买买提看人间百态

boards

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档,一周内的贴子最多显示50字,超过一周显示500字 访问原贴
Biology版 - 求助---关于nuclear protein
相关主题
help: crosslink co-immunoprecipitationDNA/oligo/primer和抗体crosslink
郁闷之极,求教CHIPendogenous protein ip 时,用antibody crosslinked beads incubate cell lysis 多
请ChIP专家帮我看看sonicating的问题chip实验求教:大家用0.5%的SDS还是用1%的SDS
借人气问如何挑单细胞?histone western blot 求教
CO IP的一些问题! 大神们进呀!请教一个关于isolation of chromatin from nuclei的问题
大侠们做chip是用sonicator还是用MNase digest?Question again, protein expression/rossetta gami/inclusion body/cell lysis
Re: 请问Co-IP中的几个问题western blot for phosphorylated protein
RIP 菜鸟求助问个关于bradford protein assay的问题
相关话题的讨论汇总
话题: protein话题: crosslink话题: isolation话题: nuclear话题: 关于
进入Biology版参与讨论
1 (共1页)
g*********3
发帖数: 177
1
关于DNA-protein complex的
一般的策略是crosslink---nuclei isolation---Sonication---IP
实验室的师兄说crosslink后细胞比较像jelly,isolation的效率可能不好。建议可以
先cell lysis/nuclei isolation---crosslink,这样可能会损失一些DNA-Protein
complex,大家有见过第二种方法吗?可否给个链接,谢谢。另外,第一种isolation的
效率怎样。
谢谢各位。
s******s
发帖数: 13035
2
native完全不用crosslink的ChIP都有,这个显然没问题。
你的啥细胞?一般sonication都能打碎,不过我以前试过thymus,
确实老是粘在一起

【在 g*********3 的大作中提到】
: 关于DNA-protein complex的
: 一般的策略是crosslink---nuclei isolation---Sonication---IP
: 实验室的师兄说crosslink后细胞比较像jelly,isolation的效率可能不好。建议可以
: 先cell lysis/nuclei isolation---crosslink,这样可能会损失一些DNA-Protein
: complex,大家有见过第二种方法吗?可否给个链接,谢谢。另外,第一种isolation的
: 效率怎样。
: 谢谢各位。

g*********3
发帖数: 177
3
谢谢。
不用crosslink...这得需要不少细胞来做吧,这样虽然少了不少background。我还想着
用longer distance的crosslinker来做的。。。

【在 s******s 的大作中提到】
: native完全不用crosslink的ChIP都有,这个显然没问题。
: 你的啥细胞?一般sonication都能打碎,不过我以前试过thymus,
: 确实老是粘在一起

1 (共1页)
进入Biology版参与讨论
相关主题
问个关于bradford protein assay的问题CO IP的一些问题! 大神们进呀!
紧急求助: 关于western blot lysis buffer大侠们做chip是用sonicator还是用MNase digest?
CHIP qpcr中的 negative control (mock antibody)Re: 请问Co-IP中的几个问题
有谁知道Sigma的nuclear isolation buffer的配方?RIP 菜鸟求助
help: crosslink co-immunoprecipitationDNA/oligo/primer和抗体crosslink
郁闷之极,求教CHIPendogenous protein ip 时,用antibody crosslinked beads incubate cell lysis 多
请ChIP专家帮我看看sonicating的问题chip实验求教:大家用0.5%的SDS还是用1%的SDS
借人气问如何挑单细胞?histone western blot 求教
相关话题的讨论汇总
话题: protein话题: crosslink话题: isolation话题: nuclear话题: 关于