t****g
发帖数: 120 | 1 在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
life只有24小时； 那岂不是天天都要加新的？ 请问你们是怎么用的？--- final
concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
谢谢！ |
n***w
发帖数: 2405 | 2 we use this in animals to induce cre expression, not cells... |
b**********8
发帖数: 349 | 3 我的做法，一次配一个高浓度的stock（eg. 100ug/ul）,然后分装若干管用锡纸包裹，
-70度冻存。同时多配几支working solution（1ug/ul），每支只分装10ul，避光保存
于-70度，以后每次用的时候取一支拿出来化冻，用完即弃。
我做肝癌细胞的，按照clontech公司网站上的建议，培养基中Dox终浓度在0.5~1.0ug/
ml时就能诱导靶基因很好的表达，更高或更低的浓度我没有试过。
换液的话，我一般每48小时换液一次，跟每天换液一次没有差别。
供参考。 |
t****g
发帖数: 120 | |
r***e
发帖数: 2539 | 5 我都是用1000x stock (2mg/ml)，反复冻融，放在-20度，没什么问题。这一般都是大大
过量的。
【在 t****g 的大作中提到】
: 在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
: doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
: life只有24小时； 那岂不是天天都要加新的？ 请问你们是怎么用的？--- final
: concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
: 谢谢！
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m********m
发帖数: 263 | 6 现用现配
【在 t****g 的大作中提到】
: 在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
: doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
: life只有24小时； 那岂不是天天都要加新的？ 请问你们是怎么用的？--- final
: concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
: 谢谢！
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w******n
发帖数: 767 | 7 没那么严重，4度放一个月没事。颜色由浅黄慢慢变深到棕色，太深就不要用了。
【在 t****g 的大作中提到】
: 在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
: doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
: life只有24小时； 那岂不是天天都要加新的？ 请问你们是怎么用的？--- final
: concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
: 谢谢！
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s********7
发帖数: 4681 | 8
【在 m********m 的大作中提到】
: 现用现配
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b**********8
发帖数: 349 | 9
不客气
-70度放一年绝对没问题，前提是没有反复冻融
【在 t****g 的大作中提到】
: 谢谢回复！ 那在-70C能放多久呢？
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