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Biology版 - 请教大家买来的细胞CHO复苏问题
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d******8
发帖数: 1972
1
对自己复苏细胞的步骤不放心,昨天来的细胞,先复苏了对照细胞系,今天还没有贴壁
。就想把实验用的细胞系暂时先在干冰和-70冰箱里保存两三天,然后根据对照细胞系再复苏。
不知道在-70度里能不能保存两三天?另外,必须离心,取出冻存液,还是直接加入培
养基也行?谢谢
k***n
发帖数: 14
2
买来的细胞会附带说明书,照着说明书做就好了。别自己另外创新办法,给自己找麻烦
。一般照着说明书不会出问题的,出了问题找公司就好了。
其他的问题,如果你是用自己制备的冷冻细胞的话,在-80c放一两年没关系,再长了
就复苏率下降了。一般可以先快速解冻,加入培养基;或者解冻后离心,去掉溶液,再
加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。
j****x
发帖数: 1704
3
个人的经验,我手头的大部分普通细胞系(Hela,293/FT,BHK,HepG2,Huh7,vero,
CHO...)在-80度存半年以上,复苏效果会大大的打折扣,超过1年的,基本就惨不忍睹了

【在 k***n 的大作中提到】
: 买来的细胞会附带说明书,照着说明书做就好了。别自己另外创新办法,给自己找麻烦
: 。一般照着说明书不会出问题的,出了问题找公司就好了。
: 其他的问题,如果你是用自己制备的冷冻细胞的话,在-80c放一两年没关系,再长了
: 就复苏率下降了。一般可以先快速解冻,加入培养基;或者解冻后离心,去掉溶液,再
: 加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。

c****g
发帖数: 93
4
cho皮实的很,-80懂上半年基本没事。复苏我们是直接取出放在37的水浴锅里直到完全
化掉,离心去上清,用medium重悬铺上即可。
d******8
发帖数: 1972
5
谢谢大家的建议。
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