d******8 发帖数: 1972 | 1 对自己复苏细胞的步骤不放心,昨天来的细胞,先复苏了对照细胞系,今天还没有贴壁
。就想把实验用的细胞系暂时先在干冰和-70冰箱里保存两三天,然后根据对照细胞系再复苏。
不知道在-70度里能不能保存两三天?另外,必须离心,取出冻存液,还是直接加入培
养基也行?谢谢 |
k***n 发帖数: 14 | 2 买来的细胞会附带说明书,照着说明书做就好了。别自己另外创新办法,给自己找麻烦
。一般照着说明书不会出问题的,出了问题找公司就好了。
其他的问题,如果你是用自己制备的冷冻细胞的话,在-80c放一两年没关系,再长了
就复苏率下降了。一般可以先快速解冻,加入培养基;或者解冻后离心,去掉溶液,再
加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。 |
j****x 发帖数: 1704 | 3 个人的经验,我手头的大部分普通细胞系(Hela,293/FT,BHK,HepG2,Huh7,vero,
CHO...)在-80度存半年以上,复苏效果会大大的打折扣,超过1年的,基本就惨不忍睹了
【在 k***n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 买来的细胞会附带说明书,照着说明书做就好了。别自己另外创新办法,给自己找麻烦 : 。一般照着说明书不会出问题的,出了问题找公司就好了。 : 其他的问题,如果你是用自己制备的冷冻细胞的话,在-80c放一两年没关系,再长了 : 就复苏率下降了。一般可以先快速解冻,加入培养基;或者解冻后离心,去掉溶液,再 : 加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。
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c****g 发帖数: 93 | 4 cho皮实的很,-80懂上半年基本没事。复苏我们是直接取出放在37的水浴锅里直到完全
化掉,离心去上清,用medium重悬铺上即可。 |
d******8 发帖数: 1972 | |