r**a
发帖数: 121 | 1 最近在做组织的FACS，用Trypsin和collagenase处理
我用的是10X Trypsin EDTA，后来发现EDTA是Trypsin和collagenase的抑制剂
Trypsin Inhibitors:
* Pancreatic-, soybean-, lima bean-, and egg white- trypsin inhibitors (
see section on Trypsin Inhibitors)
* DFP
* Aprotinin
* Ag+
* Benzamidine
* EDTA
Collagenase Inhibitors:
* EDTA, EGTA
* Cysteine, histidine
* DTT
* 2-mercaptoethanol
* o-phenanthroline
* Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+
* Not inhibited by DFP or serum
(White and White 1997)
然后，我加了CaCl2，它既可以抑制EDTA，又是collagenase的激活剂...不幸的是，做
流式的时候，facs flow回流了一点，马上就形成了大量的絮状沉淀...我的样品就这样
毁啦:(
我就不解了，这些公司怎么把trypsin和EDTA放在一起呢？
我知道，一般消化培养的细胞用PBS加EDTA处理一下，去掉这些二价离子，然后用
trypsin消化细胞，效果很好。但是也没有一起用啊！
各位前辈可不可以解释一下，两个在一起是为了什么目的啊？然后再给一点关于组织流
式时，怎么分离细胞的建议啊！折腾了很长时间了... |
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