b*********h 发帖数: 951 | 1 应该是很基础的手段,文献里到处都是,就是没做过。。。
一块胶,想既做常规的coomassie blue染色,又做放射自显影,从而确定放射性来源于
哪根条带
具体怎么弄呢? |
e****s 发帖数: 1125 | 2 跑胶,染色;
制干胶;
放到暗盒里自显影。
【在 b*********h 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 应该是很基础的手段,文献里到处都是,就是没做过。。。 : 一块胶,想既做常规的coomassie blue染色,又做放射自显影,从而确定放射性来源于 : 哪根条带 : 具体怎么弄呢?
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b*********h 发帖数: 951 | 3 多谢多谢!
常规的染色就可以了吗,是否需要额外步骤?
【在 e****s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 跑胶,染色; : 制干胶; : 放到暗盒里自显影。
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s******y 发帖数: 28562 | 4 在染完色之后,有些人会把胶泡在atufluor imaging enhancer solution
来改变胶体的结构,从而有利于放射线的穿透,对于某些比较弱的条带会有好处。
最后注意要把胶抽干,否则胶不够薄的话会有重影。
把胶抽干的时候,最好放个滤纸,然后在另外一面放个半透膜
如果不放滤纸的话,胶抽干后容易裂开。
【在 b*********h 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢多谢! : 常规的染色就可以了吗,是否需要额外步骤?
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q*******8 发帖数: 768 | 5 RE 2楼的:
跑胶,染色;
制干胶;
放到暗盒里自显影。
一般用考马斯就好了,浓度低的用银染。我没做过银染,考马斯我就小染染~~~不过最
后几步一定要做全了,特别是带甘油的那个。
暗盒可以扔-80,据说比较好~~~ |
s******s 发帖数: 13035 | 6 嗯,就是普通染色,然后干胶。我喜欢用cellulose膜,小心不要裂了。
找几个很暗的荧光标签贴上帮助定位。楼下说-80冰箱的,我也试过,
没啥大影响。你去facility看看有没有那种digital不要film的develop,
这个能快很多。我有一次放上film扔抽屉一个多月都快忘记了
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 在染完色之后,有些人会把胶泡在atufluor imaging enhancer solution : 来改变胶体的结构,从而有利于放射线的穿透,对于某些比较弱的条带会有好处。 : 最后注意要把胶抽干,否则胶不够薄的话会有重影。 : 把胶抽干的时候,最好放个滤纸,然后在另外一面放个半透膜 : 如果不放滤纸的话,胶抽干后容易裂开。
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