f*********8
发帖数: 129 | 1 夫妻店，真是不好呆。
在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
(其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。 |
p****n
发帖数: 9263 | |
x**2
发帖数: 255 | 3 没看出有说你不好的意思啊
有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
一点电还舍不得用实验室关门得了 |
f*********8
发帖数: 129 | 4 我在摇tube,老板娘以为我在摇plates (长E. coli的），老板娘就跟老板报告了，老板
就问我是不是在 shaking plates
【在 p****n 的大作中提到】
: 没看懂
|
f*********8
发帖数: 129 | 5 是没有说我我不好，可是还是感觉很不舒服。这种应该是小事吧，有时大家都是混用的
，有人在摇管子，要一起用，只能也一起摇板子了。没必要报告老板，老板再来发问吧
我就是有些觉得，他们觉得我是那种很不会做实验的。怕把实验做坏了，还浪费试剂。
反正实验室特别节省。
【在 x**2 的大作中提到】
: 没看出有说你不好的意思啊
: 有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
: 一点电还舍不得用实验室关门得了
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s******y
发帖数: 28562 | 6 可能是因为你是新手，他们不放心你的实验技能吧。
应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
一般来说应该就会好一些。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
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p****n
发帖数: 9263 | 7 哦，明白了
直接跟丫说没有啊，没看到有人摇plate啊
这种钉子碰几回，丫就没胃口了
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我在摇tube,老板娘以为我在摇plates (长E. coli的），老板娘就跟老板报告了，老板
: 就问我是不是在 shaking plates
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f*********8
发帖数: 129 | 8 他们就是担心我不懂干活乱做实验，把agar plate放进去摇。就是不相信人，处处察看
。还察看得不清楚。
【在 s******y 的大作中提到】
: 可能是因为你是新手，他们不放心你的实验技能吧。
: 应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
: 实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
: 我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
: 稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
: 一般来说应该就会好一些。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
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s******y
发帖数: 28562 | 9 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
我可能就少走很多弯路了。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 他们就是担心我不懂干活乱做实验，把agar plate放进去摇。就是不相信人，处处察看
: 。还察看得不清楚。
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C*******e
发帖数: 4348 | 10 可以展开说说为什么事sodium azide的问题么？
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
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s******y
发帖数: 28562 | 11 因为sodium azide 会抑制 HRP 的活性。
不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 可以展开说说为什么事sodium azide的问题么？
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C*******e
发帖数: 4348 | 12 多谢
我可能也犯过一样的错误
我还是用HRP和AP的
【在 s******y 的大作中提到】
: 因为sodium azide 会抑制 HRP 的活性。
: 不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
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s******y
发帖数: 28562 | 13 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
想反复用）。
后来我就再也不重复用二抗了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 多谢
: 我可能也犯过一样的错误
: 我还是用HRP和AP的
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n********k
发帖数: 2818 | 14 Ding一下，在我朋友实验室带一阵子来，新手（甚至是薄厚）那叫一个浪费！有些简直
是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
爽的，测序太耗钱的说
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
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n********k
发帖数: 2818 | 15 你是真穷。。。不过我其实也回收过二抗，有时越用越干净。。。你以前最组化很少吧
，产品说明上有警告的。。。
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
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C*******e
发帖数: 4348 | 16 没用重复用过2抗
不过多谢提醒
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
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s******y
发帖数: 28562 | 17 我在研究生院的时候从来没有做过western blot...
细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
会干净一些吧？
【在 n********k 的大作中提到】
: 你是真穷。。。不过我其实也回收过二抗，有时越用越干净。。。你以前最组化很少吧
: ，产品说明上有警告的。。。
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f*********8
发帖数: 129 | 18 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
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C*******e
发帖数: 4348 | 19 我也是从个比较比较节省的实验室出来的
以前连用gel code blue染胶倒多一点老板都会说
现在实验室太浪费了
让我很不适应
但是我又不是老板
没有立场指手划脚
【在 n********k 的大作中提到】
: Ding一下，在我朋友实验室带一阵子来，新手（甚至是薄厚）那叫一个浪费！有些简直
: 是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
: 室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
: 不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
: 醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
: 爽的，测序太耗钱的说
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s******y
发帖数: 28562 | 20 啊？那就有点比较micromanagment 了。同情你一下。。。
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
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n********k
发帖数: 2818 | 21 组化做信号耳机放大是也用hrp 的
【在 s******y 的大作中提到】
: 我在研究生院的时候从来没有做过western blot...
: 细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
: 常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
: 另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
: 会干净一些吧？
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l**********1
发帖数: 5204 | 22 你的汉字输入 就这样了 还海归同济啊
组化做信号耳机(二次) 放大是也用hrp 的?
【在 n********k 的大作中提到】
: 组化做信号耳机放大是也用hrp 的
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l**********1
发帖数: 5204 | 23 下次再mean 你
就用法语回答她/他:
Je ne vois jamais qui secouent ce que les plaques avant agitation,
avez-vous voir des choses?
=i never see whom shaked that shaker plates before, did you see stuff?
from
//translate.google.fr/?hl=fr
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
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f*********8
发帖数: 129 | 24 我今天又摇，她竟然把shaker停掉了，也不跟我说一下，太让人生气了。我明天还得摇
，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
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n********k
发帖数: 2818 | 25 You shall talk to your boss--someone turned off the shaker while you were
doing experiments...Or email to the entirely lab saying you are doing blabla
blabla...pls don't turn off the shaker blablablaaa
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我今天又摇，她竟然把shaker停掉了，也不跟我说一下，太让人生气了。我明天还得摇
: ，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
: 跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 报告。真郁闷。
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