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Biology版 - Troubleshooting for SDS-PAGE. Smear on low molecular proteins
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x********u
发帖数: 430
1
I have been running SDS-PAGE several times and cannot get clear band for low
molecular proteins. Any suggestions will be highly appreciated.
Attached is a gel picture I just took yesterday. (12% resolving gel and load
50 ug total E. coli cell lysate proteins).
p*****p
发帖数: 19331
2
自己配的胶?买的?
可能是胶不好,也可能过热
可以降低电压,放冰盒里跑
x*****o
发帖数: 441
3
用tricine sds page好像对分子量小的蛋白效果比较好.

low
load

【在 x********u 的大作中提到】
: I have been running SDS-PAGE several times and cannot get clear band for low
: molecular proteins. Any suggestions will be highly appreciated.
: Attached is a gel picture I just took yesterday. (12% resolving gel and load
: 50 ug total E. coli cell lysate proteins).

c*z
发帖数: 157
4
12%会不会太浓了?我一直以为梯度胶选择4-12%是为了防丢东西的 下面根本分不出来
曾经在一个有钱的lab,跑小蛋白 用invitrgen bis tris 6% precasted gel, bis-
tris buffer
膜用PVDF, 不用NC的,怕丢

【在 x*****o 的大作中提到】
: 用tricine sds page好像对分子量小的蛋白效果比较好.
:
: low
: load

D*a
发帖数: 6830
5
我们也在摸条件,前几次用的16.5%的SDS-PAGE跑6KDa的蛋白。有条带但是比较粗,下
边的smear不知道是什么。
今天同时用了4-20%梯度的,梯度的明显跑的好,第一次看见marker的4kDa的带。以前
16.5%看不见这条带。
等结果出来再上来汇报汇报。
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