t****t
发帖数: 86 | 1 如果不想让它们分化，是不是一定要在ultra low attachment plate里培养？
我一把它们转到普通培养皿里他们就贴壁，不像文献里说的会形成neurosphere。
先谢过了！ |
a*****x
发帖数: 901 | |
t****t
发帖数: 86 | 3 我用的Neurobasal A +bFGF （10 ng/ml）+EGF（10）+B27（2%）+Glutamax （0.5mM）
+P/S
能提供点建议吗？
【在 a*****x 的大作中提到】
: 用flask就可以。培养液很关键。
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a*****x
发帖数: 901 | 4 B27有没有注意不含retinoic acid。FGF可以更高一些。 |
t****t
发帖数: 86 | 5 谢谢，回去试试，有结果再来汇报
【在 a*****x 的大作中提到】
: B27有没有注意不含retinoic acid。FGF可以更高一些。
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B******w
发帖数: 1040 | 6 一般用DMEM/F12培养液吧
【在 t****t 的大作中提到】
: 我用的Neurobasal A +bFGF （10 ng/ml）+EGF（10）+B27（2%）+Glutamax （0.5mM）
: +P/S
: 能提供点建议吗？
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u**********d
发帖数: 573 | 7 不想让它们分化，就给它们mitogen，如楼上说的fgf2和egf。但是NSC传不了几代就会
自发分化的，要是这时候还给mitogen，glia就会大量地冒出来。
【在 t****t 的大作中提到】
: 如果不想让它们分化，是不是一定要在ultra low attachment plate里培养？
: 我一把它们转到普通培养皿里他们就贴壁，不像文献里说的会形成neurosphere。
: 先谢过了！
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a****d
发帖数: 1919 | 8 Ultra Low Attachment Multiple Well Plates help sphere formation.
Alternatively, you can coat regular plate with gelatin to prevent cell
adherence. |
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l**********1
发帖数: 5204 | 9 Mark!
LZ can try ultra-low attachment 96-well plate
plus two papers:
Zhang J et al. (2009)
Functional cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells.
Circ Res. 104: e30-41.
link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19213953
and
Sheridan SD et al.
Analysis of embryoid bodies derived from human induced pluripotent stem
cells as a means to assess pluripotency.
Stem Cells Int. 2012:738910.
link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22550517
【在 a****d 的大作中提到】
: Ultra Low Attachment Multiple Well Plates help sphere formation.
: Alternatively, you can coat regular plate with gelatin to prevent cell
: adherence.
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m******n
发帖数: 121 | 10 我们是用polyheme coat flask养sphere，然后就不怎么贴壁了。虽然我一直不知道具
体机制。 |
g*********5
发帖数: 2533 | 11 thanks. I know the gelatin function here.
【在 a****d 的大作中提到】
: Ultra Low Attachment Multiple Well Plates help sphere formation.
: Alternatively, you can coat regular plate with gelatin to prevent cell
: adherence.
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