s*****g
发帖数: 87 | 1 最近要检测一个蛋白的表达量，但是这个蛋白在细胞内的表达量很低
请教各位达人，以下哪个方法更灵敏，或者说更有可能检测到蛋白的表达？
1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody.
2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary
antibody
谢谢！ |
a*****n
发帖数: 2835 | 2 2
1 不能保证特异性啊
secondary
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近要检测一个蛋白的表达量，但是这个蛋白在细胞内的表达量很低
: 请教各位达人，以下哪个方法更灵敏，或者说更有可能检测到蛋白的表达？
: 1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody.
: 2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary
: antibody
: 谢谢！
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f*****f
发帖数: 195 | 3 Western 要好得多。抗体非特异性结合荧光强度cutoff很难确定。wB好处是有分子量参
照。
secondary
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近要检测一个蛋白的表达量，但是这个蛋白在细胞内的表达量很低
: 请教各位达人，以下哪个方法更灵敏，或者说更有可能检测到蛋白的表达？
: 1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody.
: 2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary
: antibody
: 谢谢！
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s*****g
发帖数: 87 | |
s*****g
发帖数: 7857 | 5 WB可以用half regular ECL kit solution 加 Millpore 的强化ECL kit solution (
mixed)(背景太强,所以用些regular ECL kit solution ).
1st 胶片爆 30s,
然后4张胶片摞起来,爆10分钟...
最后挑最好的. |
r***e
发帖数: 2539 | 6 太浪费了吧，一张膜用5张x光片？？
【在 s*****g 的大作中提到】
: WB可以用half regular ECL kit solution 加 Millpore 的强化ECL kit solution (
: mixed)(背景太强,所以用些regular ECL kit solution ).
: 1st 胶片爆 30s,
: 然后4张胶片摞起来,爆10分钟...
: 最后挑最好的.
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s*****g
发帖数: 7857 | 7 你买名牌货,当然太浪费.但用Denville的就还可以了.何况有时侯不同爆的时间,还是有
不同差异的.比如爆时间太长,可能就看不出差异了.
【在 r***e 的大作中提到】
: 太浪费了吧，一张膜用5张x光片？？
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t*******n
发帖数: 446 | |
s*****g
发帖数: 87 | |
