s*****g 发帖数: 87 | 1 最近要检测一个蛋白的表达量,但是这个蛋白在细胞内的表达量很低
请教各位达人,以下哪个方法更灵敏,或者说更有可能检测到蛋白的表达?
1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody.
2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary
antibody
谢谢! |
a*****n 发帖数: 2835 | 2 2
1 不能保证特异性啊
secondary
【在 s*****g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近要检测一个蛋白的表达量,但是这个蛋白在细胞内的表达量很低 : 请教各位达人,以下哪个方法更灵敏,或者说更有可能检测到蛋白的表达? : 1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody. : 2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary : antibody : 谢谢!
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f*****f 发帖数: 195 | 3 Western 要好得多。抗体非特异性结合荧光强度cutoff很难确定。wB好处是有分子量参
照。
secondary
【在 s*****g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近要检测一个蛋白的表达量,但是这个蛋白在细胞内的表达量很低 : 请教各位达人,以下哪个方法更灵敏,或者说更有可能检测到蛋白的表达? : 1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody. : 2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary : antibody : 谢谢!
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s*****g 发帖数: 87 | |
s*****g 发帖数: 7857 | 5 WB可以用half regular ECL kit solution 加 Millpore 的强化ECL kit solution (
mixed)(背景太强,所以用些regular ECL kit solution ).
1st 胶片爆 30s,
然后4张胶片摞起来,爆10分钟...
最后挑最好的. |
r***e 发帖数: 2539 | 6 太浪费了吧,一张膜用5张x光片??
【在 s*****g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : WB可以用half regular ECL kit solution 加 Millpore 的强化ECL kit solution ( : mixed)(背景太强,所以用些regular ECL kit solution ). : 1st 胶片爆 30s, : 然后4张胶片摞起来,爆10分钟... : 最后挑最好的.
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s*****g 发帖数: 7857 | 7 你买名牌货,当然太浪费.但用Denville的就还可以了.何况有时侯不同爆的时间,还是有
不同差异的.比如爆时间太长,可能就看不出差异了.
【在 r***e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 太浪费了吧,一张膜用5张x光片??
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t*******n 发帖数: 446 | |
s*****g 发帖数: 87 | |