C******T 发帖数: 300 | 1 最近需要Knockdown一个蛋白,然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue
。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到?我查了一下文献,没有人提供这个
siRNA-resistant mutants要突变哪些位点?还是我买一个vector,把mutant的cDNA放
到这个vector上?
多谢多谢 |
a****k 发帖数: 1130 | 2 。。。。@_@
找到你用的siRNA target该protein的具体位置,site-direct mutagenesis改变该处序
列但尽量保证amino acid不变
rescue
【在 C******T 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近需要Knockdown一个蛋白,然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue : 。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到?我查了一下文献,没有人提供这个 : siRNA-resistant mutants要突变哪些位点?还是我买一个vector,把mutant的cDNA放 : 到这个vector上? : 多谢多谢
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C******T 发帖数: 300 | 3 多谢多谢。从来没有做过siRNA。很菜鸟。
【在 a****k 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 。。。。@_@ : 找到你用的siRNA target该protein的具体位置,site-direct mutagenesis改变该处序 : 列但尽量保证amino acid不变 : : rescue
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w********r 发帖数: 1431 | 4 也可以订几个target 3'-UTR的siRNA,
然后用wt的cDNA做rescue就可以了。 |
p*****e 发帖数: 280 | 5 还有人图省事搞个不同物种的蛋白做rescue,比如人细胞转鼠蛋白
rescue
【在 C******T 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 最近需要Knockdown一个蛋白,然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue : 。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到?我查了一下文献,没有人提供这个 : siRNA-resistant mutants要突变哪些位点?还是我买一个vector,把mutant的cDNA放 : 到这个vector上? : 多谢多谢
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