t******k 发帖数: 599 | 1 最近在做postnatal小老鼠(大概p0-p4)tamoxifen induce,主要也是研究这个时期的
变化,然后发现有一堆问题。。。
这么小的老鼠,到底是对怀孕的母老鼠用药好呢,还是生出来以后ip好呢?我看到有文
献是对生出来以后的小鼠做ip,然后就试了这个方法,结果针头一出来,oil就滚滚的
出来了(在p10的老鼠里做过,没有这个问题),搞得极度郁闷。一是不知道到底打进
去没,二是这样的话很有可能污染cage,然后污染父母老鼠,搞得之后的后代都不敢用
了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢?
现在头也要大了,不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。 |
n***w 发帖数: 2405 | 2 唉给小小鼠ip。。。
当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的,我就试了一下,结果刷刷
的,小小鼠就给挤出来,最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时,sc不适用于
tamoxifen吧。。。
有些东西,就是得learn in a hard way... |
t******k 发帖数: 599 | 3 今天是诸事不宜啊,实验室和动物房之间跑了n趟,不是忘了这个就是忘了那个,然后
再又是tamoxifen这破事,感觉应该说服老板转向研究adult老鼠算了。。。。。
【在 n***w 的大作中提到】 : 唉给小小鼠ip。。。 : 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的,我就试了一下,结果刷刷 : 的,小小鼠就给挤出来,最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时,sc不适用于 : tamoxifen吧。。。 : 有些东西,就是得learn in a hard way...
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G********e 发帖数: 528 | 4 核酸是水溶性的,为什么要加有毒的DMSO?
你找错文献了
【在 n***w 的大作中提到】 : 唉给小小鼠ip。。。 : 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的,我就试了一下,结果刷刷 : 的,小小鼠就给挤出来,最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时,sc不适用于 : tamoxifen吧。。。 : 有些东西,就是得learn in a hard way...
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z****u 发帖数: 1007 | 5 针头太粗了吧。。用最细的26G
要么就是嘴巴灌。给母鼠用造成流产的几率比较大,一死死一窝。
Tamoxifen这个技术真是设计的不好。谁整的哦。远不如doxy 诱导有效,安全。
【在 t******k 的大作中提到】 : 最近在做postnatal小老鼠(大概p0-p4)tamoxifen induce,主要也是研究这个时期的 : 变化,然后发现有一堆问题。。。 : 这么小的老鼠,到底是对怀孕的母老鼠用药好呢,还是生出来以后ip好呢?我看到有文 : 献是对生出来以后的小鼠做ip,然后就试了这个方法,结果针头一出来,oil就滚滚的 : 出来了(在p10的老鼠里做过,没有这个问题),搞得极度郁闷。一是不知道到底打进 : 去没,二是这样的话很有可能污染cage,然后污染父母老鼠,搞得之后的后代都不敢用 : 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢? : 现在头也要大了,不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。
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w*e 发帖数: 740 | 6 从小鼠腿部和腹部交界处进针,用胰岛素注射针, 非常细的那种。
多练习,很少流出来,我们以前天天做,没问题
【在 t******k 的大作中提到】 : 最近在做postnatal小老鼠(大概p0-p4)tamoxifen induce,主要也是研究这个时期的 : 变化,然后发现有一堆问题。。。 : 这么小的老鼠,到底是对怀孕的母老鼠用药好呢,还是生出来以后ip好呢?我看到有文 : 献是对生出来以后的小鼠做ip,然后就试了这个方法,结果针头一出来,oil就滚滚的 : 出来了(在p10的老鼠里做过,没有这个问题),搞得极度郁闷。一是不知道到底打进 : 去没,二是这样的话很有可能污染cage,然后污染父母老鼠,搞得之后的后代都不敢用 : 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢? : 现在头也要大了,不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。
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n***w 发帖数: 2405 | 7 BrdU在水里最多是10mg/ml...然后我用的剂量是100ug/g body weight....
所以得配高浓度的BrdU... 所以就需要用DMSO...
【在 G********e 的大作中提到】 : 核酸是水溶性的,为什么要加有毒的DMSO? : 你找错文献了
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t******k 发帖数: 599 | 8 其实我用的针头是27的。。。
对我的话灌是最容易的了,让动物房的人做就行,就是小小鼠太小不知道能不能灌,妈
妈的话又有风险。。。
【在 z****u 的大作中提到】 : 针头太粗了吧。。用最细的26G : 要么就是嘴巴灌。给母鼠用造成流产的几率比较大,一死死一窝。 : Tamoxifen这个技术真是设计的不好。谁整的哦。远不如doxy 诱导有效,安全。
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t******k 发帖数: 599 | 9 谢谢,我去试试看。
【在 w*e 的大作中提到】 : 从小鼠腿部和腹部交界处进针,用胰岛素注射针, 非常细的那种。 : 多练习,很少流出来,我们以前天天做,没问题
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s******r 发帖数: 2876 | 10 P1的小老鼠,可以直接打进胃里。
【在 t******k 的大作中提到】 : 最近在做postnatal小老鼠(大概p0-p4)tamoxifen induce,主要也是研究这个时期的 : 变化,然后发现有一堆问题。。。 : 这么小的老鼠,到底是对怀孕的母老鼠用药好呢,还是生出来以后ip好呢?我看到有文 : 献是对生出来以后的小鼠做ip,然后就试了这个方法,结果针头一出来,oil就滚滚的 : 出来了(在p10的老鼠里做过,没有这个问题),搞得极度郁闷。一是不知道到底打进 : 去没,二是这样的话很有可能污染cage,然后污染父母老鼠,搞得之后的后代都不敢用 : 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢? : 现在头也要大了,不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。
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t******k 发帖数: 599 | 11 这么狂野的方法?!!
【在 s******r 的大作中提到】 : P1的小老鼠,可以直接打进胃里。
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G********e 发帖数: 528 | 12 你确定你用100ug/g?如果你用100ug/g,打一只20g的老鼠也就需要2mg吧,配在水里也
就需要200ul
难道你用100mg/g?这绝对是天价
如果我计算没错的话,那就是你错了,brdu配在水里注射非常容易
【在 n***w 的大作中提到】 : BrdU在水里最多是10mg/ml...然后我用的剂量是100ug/g body weight.... : 所以得配高浓度的BrdU... 所以就需要用DMSO...
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n***w 发帖数: 2405 | 13 我没算错阿。。。
我确定我用100ug/g body weight。
我下次可以配在水里试一下。
谢谢。
【在 G********e 的大作中提到】 : 你确定你用100ug/g?如果你用100ug/g,打一只20g的老鼠也就需要2mg吧,配在水里也 : 就需要200ul : 难道你用100mg/g?这绝对是天价 : 如果我计算没错的话,那就是你错了,brdu配在水里注射非常容易
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z****u 发帖数: 1007 | |
n***w 发帖数: 2405 | 15 100ug/g浓度高吗?我就是看了文献里用了这个浓度,所以就上了,反正也work。。。
我就是看retinal cell proliferation...
【在 z****u 的大作中提到】 : 做啥分析哦。。BrdU要那么高的浓度?
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t******k 发帖数: 599 | 16 哎 今天换了insulin注射器(30g)的还是都漏了,搞得动物房的工作人员都集体开会
讨论具体该咋办了。。。 |
D*a 发帖数: 6830 | 17 你打小奶鼠的话它妈也会去舔啊,还有大家互相吃粑粑,也会吸收tam的吧,当然吸收
得少点。 |
t******k 发帖数: 599 | 18 那要咋办才好呀,我都有放弃做postnatal的冲动了
【在 D*a 的大作中提到】 : 你打小奶鼠的话它妈也会去舔啊,还有大家互相吃粑粑,也会吸收tam的吧,当然吸收 : 得少点。
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t******k 发帖数: 599 | 19 oh yeah 找到一片cell的文章他们是用sc给p0小鼠打tamoxifen的,准备明天去试试看
。。。
【在 n***w 的大作中提到】 : 唉给小小鼠ip。。。 : 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的,我就试了一下,结果刷刷 : 的,小小鼠就给挤出来,最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时,sc不适用于 : tamoxifen吧。。。 : 有些东西,就是得learn in a hard way...
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h**q 发帖数: 22 | 20 温柔一点灌
Tip放嘴里,不插到胃里,找对位置了可以看到它drinking |