m******t
发帖数: 44 | 1 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
oncogene的作用，如果将来写成文章的话。 |
D*a
发帖数: 6830 | 2 那就加个单独luciferase gene的对照？ |
m*****u
发帖数: 15526 | 3 很多质粒自己就带luciferase标记。所以也不用做两个转染。
【在 m******t 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
: luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
: 它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
: oncogene的作用，如果将来写成文章的话。
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s******y
发帖数: 28562 | 4 没有问题。
两个转染还可以同时做。根据我们转不同荧光蛋白的经验，一般来说能转进gene A 的
细胞，超过90% 也会同时转上geneB
【在 m******t 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
: luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
: 它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
: oncogene的作用，如果将来写成文章的话。
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m******t
发帖数: 44 | 5 那么是不是可以这样说，就是同时转染的成功性还是很高的，也就是说两个转染之间不
太会有什么干扰，当然还是要做个单独转染的对比。那么一般都对比些什么呢？细胞的
活性，还有其他？ |
e****s
发帖数: 1125 | 6 我们有的assay要同时转染3-4个不同的蛋白进去。 |
m*****u
发帖数: 15526 | 7 这不就是诱导ips干的事么
【在 e****s 的大作中提到】
: 我们有的assay要同时转染3-4个不同的蛋白进去。
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C**S
发帖数: 522 | 8 用稳定表达luciferase的细胞来做实验不就行了？
【在 m******t 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
: luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
: 它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
: oncogene的作用，如果将来写成文章的话。
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m******t
发帖数: 44 | 9 是这样的，我们想自己转染luciferase到一个新的细胞系，然后再转染一个oncogene。
就是不知道这样的成功的可能性有多大。我们相信转染这个步骤应该能成功，就是不知
道两次转染后的细胞所生成的结果会不会被审稿人接受。有谁碰巧知道哪篇文章上用过
两次转染，我想看看他们是怎么样来证明两次转染没有增加不确定因素的。 |
m*****u
发帖数: 15526 | 10 用带luciferase报告基因的质粒就完了。何必转两次？
【在 m******t 的大作中提到】
: 是这样的，我们想自己转染luciferase到一个新的细胞系，然后再转染一个oncogene。
: 就是不知道这样的成功的可能性有多大。我们相信转染这个步骤应该能成功，就是不知
: 道两次转染后的细胞所生成的结果会不会被审稿人接受。有谁碰巧知道哪篇文章上用过
: 两次转染，我想看看他们是怎么样来证明两次转染没有增加不确定因素的。
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e****s
发帖数: 1125 | 11 没那么高级，
就是简单的Kinase assay。:(
【在 m*****u 的大作中提到】
: 这不就是诱导ips干的事么
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C**S
发帖数: 522 | 12 已经有无数实验室用GFP，RFP，luciferase等等标记细胞甚至动物。用标记过的细胞做
实验没有任何问题，你的第二次转染总是要做control的吧。
【在 m******t 的大作中提到】
: 是这样的，我们想自己转染luciferase到一个新的细胞系，然后再转染一个oncogene。
: 就是不知道这样的成功的可能性有多大。我们相信转染这个步骤应该能成功，就是不知
: 道两次转染后的细胞所生成的结果会不会被审稿人接受。有谁碰巧知道哪篇文章上用过
: 两次转染，我想看看他们是怎么样来证明两次转染没有增加不确定因素的。
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g*******r
发帖数: 129 | 13 No problem. Co-transfection.
【在 m******t 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家，就是能不能对一种细胞做两种转染,比如一种让这个细胞带上
: luciferase gene，这样可以做影像，同时在对这个细胞转染一种oncogene, 这样来看
: 它对细胞的影响。同时做两种转染会不会使得数据分析复杂化，也就是说不容易确定
: oncogene的作用，如果将来写成文章的话。
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