s******r
发帖数: 2876 | 1 要来一个转基因的cre line，cre 整合位点不知道，
一般大家怎么来cross，保证这个转进去的cre不会丢掉？ |
g*****n
发帖数: 250 | |
s******r
发帖数: 2876 | 3 这也是个办法。
再问一下，一般转基因都不止一个拷贝吧？
也不一定都在同一条染色体上吧？
那他的后代里面遗传的是哪一个或哪几个copy，岂不是没什么简单的办法
来分辨。
【在 g*****n 的大作中提到】
: 把精子冻起来。
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m*****u
发帖数: 15526 | 4 应该提供了PCR genotyping的方法吧？
【在 s******r 的大作中提到】
: 要来一个转基因的cre line，cre 整合位点不知道，
: 一般大家怎么来cross，保证这个转进去的cre不会丢掉？
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s******r
发帖数: 2876 | 5 P的是Cre，
有多少Cre应该P不出来吧。
【在 m*****u 的大作中提到】
: 应该提供了PCR genotyping的方法吧？
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m*****u
发帖数: 15526 | 6 一般来说primers有一个会设计在插入序列旁边的老鼠genome上作为common,一个在cre
insert上作为mutant,还有一个在没有插入序列的genome上作为wild type.所以应该能
分出来
【在 s******r 的大作中提到】
: P的是Cre，
: 有多少Cre应该P不出来吧。
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w*e
发帖数: 740 | 7 一般大家就是做做PCR，知道有无就可以了
至于多少,大多数情况对实验影响不大,而且经过几代以后,一般就只有一个染色体的插
入位点了
【在 s******r 的大作中提到】
: 要来一个转基因的cre line，cre 整合位点不知道，
: 一般大家怎么来cross，保证这个转进去的cre不会丢掉？
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s******r
发帖数: 2876 | 8 这个是transgenic，插哪儿了不知道。
cre
【在 m*****u 的大作中提到】
: 一般来说primers有一个会设计在插入序列旁边的老鼠genome上作为common,一个在cre
: insert上作为mutant,还有一个在没有插入序列的genome上作为wild type.所以应该能
: 分出来
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s******r
发帖数: 2876 | 9 看来就是这么PCR了。
估计前面的实验室也养了一段时间了，应该差不多了。
【在 w*e 的大作中提到】
: 一般大家就是做做PCR，知道有无就可以了
: 至于多少,大多数情况对实验影响不大,而且经过几代以后,一般就只有一个染色体的插
: 入位点了
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