b****e 发帖数: 52 | 1 最近在用mitotracker633( 500nM 30min)标记细胞,不知道是时间太长还是浓度太高,线
粒体都变成圆的了.用CytoC抗体染色又是正常的.是不是mitotracker处理太久对细胞也
有毒害呢? 多谢指教! | m*******e 发帖数: 90 | 2 浓度好像有点高,我用MitoTracker® Red CMXRos,50nM,20min.效果很好。
【在 b****e 的大作中提到】 : 最近在用mitotracker633( 500nM 30min)标记细胞,不知道是时间太长还是浓度太高,线 : 粒体都变成圆的了.用CytoC抗体染色又是正常的.是不是mitotracker处理太久对细胞也 : 有毒害呢? 多谢指教!
| h*******o 发帖数: 4884 | 3 500nM太高了吧
除非你要fix细胞而且要确保能染上
一般做live image,Mitotracker Red我才用20-40nM | b****e 发帖数: 52 | 4 是要用来fix染其他蛋白的,所以用了他们推荐的最高浓度. 对细胞的毒性是因为破坏了
mito的膜电位吗?在这个浓度下,好像实验组比对照组更sentitive. 不知道是不是说明
实验组有一定的功能缺陷呢? | m******h 发帖数: 38 | 5 Hela cell, 30nM perfect. | h*******o 发帖数: 4884 | 6 我建议你可以直接用ICC的方法染个mitochondrial protein,看看型态是不是同样有变化
另外mitotracker 不是定量 membrane potential的试剂,最好用TMRM, 实在不行可以
用JC-1
【在 b****e 的大作中提到】 : 是要用来fix染其他蛋白的,所以用了他们推荐的最高浓度. 对细胞的毒性是因为破坏了 : mito的膜电位吗?在这个浓度下,好像实验组比对照组更sentitive. 不知道是不是说明 : 实验组有一定的功能缺陷呢?
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