d**l
发帖数: 1546 | |
D***s
发帖数: 5613 | 2 只能装一双钛合金狗眼了
【在 d**l 的大作中提到】
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r***e
发帖数: 2539 | 3 不要用film就没有问题，买一套western成像系统，GE的不贵，based on HRP，挺好用，
Biorad的比较贵。
不喜欢那种二抗带荧光的系统。
【在 d**l 的大作中提到】
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a********k
发帖数: 2273 | 4 买Life technologies的kit，用Quant Dot的二抗，DNA胶用的系统就能照相
【在 d**l 的大作中提到】
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a****n
发帖数: 43 | 5 去买显影液和定影液，找个小黑屋自己压片子就行了。
【在 d**l 的大作中提到】
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s******y
发帖数: 28562 | 6 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片，主要是夹在当天的
实验记录里，查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本，但是非常的不方便，比方说假如实验中间
出现了什么异常，随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
机，或者至少得抄起个iPad 啥的来输入，这样耽误时间而且又得换手套，烦啊。
【在 a****n 的大作中提到】
: 去买显影液和定影液，找个小黑屋自己压片子就行了。
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d******u
发帖数: 99 | 7 you can use AP coupled secondary antibody for directly observation. |
g*****n
发帖数: 250 | 8 这个挺好。敏感度如何？
【在 d******u 的大作中提到】
: you can use AP coupled secondary antibody for directly observation.
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s******y
发帖数: 28562 | 9 我以前用过这个，线形响应性很差。特别是因为一些信号太强的带会自发的进行扩散，
最后弄的作出来的东西经常脏的一塌糊涂
【在 d******u 的大作中提到】
: you can use AP coupled secondary antibody for directly observation.
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C*******e
发帖数: 4348 | 10 用AP conjugated 2nd 哪有那么烂
是一抗太差吧
HRP的如果信号太强的带还可能很快quench呢
另外lz:
用HRP的也有substrate可以买来显色做colometric的
【在 s******y 的大作中提到】
: 我以前用过这个，线形响应性很差。特别是因为一些信号太强的带会自发的进行扩散，
: 最后弄的作出来的东西经常脏的一塌糊涂
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s******c
发帖数: 331 | 11 做wb几乎从没用过暗室和developer，都是用fluorophore conjugated antibody。
如果某种一抗经常用，就去标记那个一抗，alexa dye那么多，想500nm就500nm，想
800nm就800nm，还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane，最
后用个imaging的机器去看就行了，sensitivity，contrast，用啥波长都随便调，根本
不用二抗，WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说，现在licor odyssey难道不
是很多人买吗？
如果一抗经常换，二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~
【在 d**l 的大作中提到】
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g*****n
发帖数: 250 | 12 谢谢。你的回帖打消了我的疑虑。准备上彩色WB.
【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer，都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用，就去标记那个一抗，alexa dye那么多，想500nm就500nm，想
: 800nm就800nm，还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane，最
: 后用个imaging的机器去看就行了，sensitivity，contrast，用啥波长都随便调，根本
: 不用二抗，WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说，现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗？
: 如果一抗经常换，二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~
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h********n
发帖数: 4079 | 13 LAS-4000 system,
use regular antibody and TLC reagent. |
s*****g
发帖数: 7857 | 14 我觉得机器成象比较敏感(奶奶的,有时背景也高)(用圆珠笔标一下膜的边边,就能毁了
好结果!)
胶片没那么敏感,但质量好得多.
我也还是喜欢照片
【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片，主要是夹在当天的
: 实验记录里，查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本，但是非常的不方便，比方说假如实验中间
: 出现了什么异常，随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机，或者至少得抄起个iPad 啥的来输入，这样耽误时间而且又得换手套，烦啊。
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s*****g
发帖数: 7857 | 15 一抗经常换，二抗去标记fluorophore
是最好的
【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer，都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用，就去标记那个一抗，alexa dye那么多，想500nm就500nm，想
: 800nm就800nm，还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane，最
: 后用个imaging的机器去看就行了，sensitivity，contrast，用啥波长都随便调，根本
: 不用二抗，WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说，现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗？
: 如果一抗经常换，二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~
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g*********5
发帖数: 2533 | 16 jiu shi bushuo.
【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片，主要是夹在当天的
: 实验记录里，查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本，但是非常的不方便，比方说假如实验中间
: 出现了什么异常，随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机，或者至少得抄起个iPad 啥的来输入，这样耽误时间而且又得换手套，烦啊。
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y****6
发帖数: 196 | 17 Try C-digit from LI-COR if your budget is limited. |
c**********r
发帖数: 2372 | 18 fluorescence的odyssey总觉得比developer要贵，不知真假，求证。 |
q******g
发帖数: 3858 | 19 要是人手一个IPAD记录试验就好了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片，主要是夹在当天的
: 实验记录里，查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本，但是非常的不方便，比方说假如实验中间
: 出现了什么异常，随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机，或者至少得抄起个iPad 啥的来输入，这样耽误时间而且又得换手套，烦啊。
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s*****i
发帖数: 315 | 20 用 LICOR 扫膜啊，二抗非常好用，能重复使用至少三个月
【在 d**l 的大作中提到】
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b*******H
发帖数: 830 | 21 彩色成像，还能定量分析。
只是如此以来什么试剂都要用它的了。
【在 s*****i 的大作中提到】
: 用 LICOR 扫膜啊，二抗非常好用，能重复使用至少三个月
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S**1
发帖数: 35 | 22 不好意思没用过这个，想跟着问清楚一些：如果用fluorophore conjugated antibody
，那可以用BIO-RAD 的 Gel doc EZ imager 来检测吗？ 还是必须买那个licor
odyssey？ 还有在检测之前要做什么处理？ 是不是直接洗完二抗就行了？另外
fluorophore conjugated antibody（主要是二抗）在哪买最好？谢谢！
【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer，都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用，就去标记那个一抗，alexa dye那么多，想500nm就500nm，想
: 800nm就800nm，还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane，最
: 后用个imaging的机器去看就行了，sensitivity，contrast，用啥波长都随便调，根本
: 不用二抗，WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说，现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗？
: 如果一抗经常换，二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~
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M*****n
发帖数: 16729 | 23 买一台成像系统
最多2万5
life tech有一个很小的，看着很不错。 |
