t**l
发帖数: 109 | 1 第一个问题是： 这个retroviral 系统会不会导致random integration?
如果有random integration,这个问题是不是已经被忽略了？
第二个问题是： 这个shRNA 是不是永久表达? drug selection gene 需不需要加，如
果有GFP在这个construct里面，能不能FACS出来GFP+ 细胞，是不是就不需要drug
selection gene.
第三个问题： 当初的viral transduction效率有多高？ 在ES细胞上如何。
最后一个问题是： 如果做screen, 这个barcode 当初在做library的时候是不是唯一的。 | c******r
发帖数: 3778 | 2
//会
//是
//是
drug selection gene 需不需要加，
//一般drug selection 比较方便长期保持shRNA表达。
如
//可以。但是如果长期培养，会导致逐步失去shRNA的表达，也失去GFP表达。
//depends，自己测试就知道了。
的。
//看barcode怎么设计的。一般应该是的。
【在 t**l 的大作中提到】
: 第一个问题是： 这个retroviral 系统会不会导致random integration?
: 如果有random integration,这个问题是不是已经被忽略了？
: 第二个问题是： 这个shRNA 是不是永久表达? drug selection gene 需不需要加，如
: 果有GFP在这个construct里面，能不能FACS出来GFP+ 细胞，是不是就不需要drug
: selection gene.
: 第三个问题： 当初的viral transduction效率有多高？ 在ES细胞上如何。
: 最后一个问题是： 如果做screen, 这个barcode 当初在做library的时候是不是唯一的。
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