求教问一个Gibson Assembly的问题 - Biology版

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Biology版 - 求教问一个Gibson Assembly的问题

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y********8
发帖数: 23

做Gibson Assembly把两个DNA片段，分别是（5K和4.8K）连接进2.3kb的backbone，
但是每次的测序的结果都是两个DNA insertion（5K和4.8K）中间都会缺失很大一个片
段，但是和backbone overlap的片段都在，实在想不出来为什么会这样，所以想求教大
家。谢谢！

k****l
发帖数: 279

片段切胶纯化了吗？
连起来之后就能表达吗？如果是，怕蛋白对细菌有毒性

【在 y********8 的大作中提到】

: 做Gibson Assembly把两个DNA片段，分别是（5K和4.8K）连接进2.3kb的backbone，
: 但是每次的测序的结果都是两个DNA insertion（5K和4.8K）中间都会缺失很大一个片
: 段，但是和backbone overlap的片段都在，实在想不出来为什么会这样，所以想求教大
: 家。谢谢！

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