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Biology版 - 小分子量蛋白片段转染表达问题
相关主题
求教:用total mRNA 做in vitro translation然后Western检测Sigma这个垃圾公司气死我了!
问下关于蛋白修饰Protein Posttranslational modification问题求教
有没有蛋白本身是高度ubiquitinated的?请教一下关于cycloheximide和actinomycin D这俩抑制剂
蛋白计算的大小和WB检测的大小相差太多是为何?为啥做overexpression却检测不到蛋白过量表达?
有没有磨细胞的微型管?求助,proteasome inhibitor
请推荐In Vitro Transcription / Translation kits求推荐Cycloheximide
请教一下有用过MG132的同学们flag tag 难以检测到
为什么在IB中能看到变化而PCR中却不能呢?用qPCR检测mRNA,高1000倍,却看不到蛋白
相关话题的讨论汇总
话题: 片段话题: tag话题: myc话题: 分子量话题: 转染
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s**********a
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1
一个蛋白,分成几个片段,MYC tag,转染进293T,其他片段都能用anti-MYC
antibody 检测到,只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的,总共不超过
10KD。),检测不到。但把这个片段克隆进原核表达
载体能在细菌中表达。
请问这是一种什么情况,大家遇到过么,怎么解决,谢谢!
e****s
发帖数: 1125
2
看多大了。这种片断,特别是小的,容易被降解。 可以试试看把它融合在一个蛋白的
tag后面,GFP之类的。

【在 s**********a 的大作中提到】
: 一个蛋白,分成几个片段,MYC tag,转染进293T,其他片段都能用anti-MYC
: antibody 检测到,只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的,总共不超过
: 10KD。),检测不到。但把这个片段克隆进原核表达
: 载体能在细菌中表达。
: 请问这是一种什么情况,大家遇到过么,怎么解决,谢谢!

s**********a
发帖数: 92
3
谢谢!总共70个氨基酸。我可以试试加个大点的Tag. 另外,有防止降解的好方法么
,我试过MG132,不好使。

【在 e****s 的大作中提到】
: 看多大了。这种片断,特别是小的,容易被降解。 可以试试看把它融合在一个蛋白的
: tag后面,GFP之类的。

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相关主题
用qPCR检测mRNA,高1000倍,却看不到蛋白有没有磨细胞的微型管?
私活干不下去了请推荐In Vitro Transcription / Translation kits
S35labeling+ IkBalpha IP, 这个实验非做不可嘛?请教一下有用过MG132的同学们
那个cycloheximide增加蛋白量的帖被删了,我的答案为什么在IB中能看到变化而PCR中却不能呢?
求教:用total mRNA 做in vitro translation然后Western检测Sigma这个垃圾公司气死我了!
问下关于蛋白修饰Protein Posttranslational modification问题求教
有没有蛋白本身是高度ubiquitinated的?请教一下关于cycloheximide和actinomycin D这俩抑制剂
蛋白计算的大小和WB检测的大小相差太多是为何?为啥做overexpression却检测不到蛋白过量表达?
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