s**********a 发帖数: 92 | 1 一个蛋白,分成几个片段,MYC tag,转染进293T,其他片段都能用anti-MYC
antibody 检测到,只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的,总共不超过
10KD。),检测不到。但把这个片段克隆进原核表达
载体能在细菌中表达。
请问这是一种什么情况,大家遇到过么,怎么解决,谢谢! | e****s 发帖数: 1125 | 2 看多大了。这种片断,特别是小的,容易被降解。 可以试试看把它融合在一个蛋白的
tag后面,GFP之类的。
【在 s**********a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 一个蛋白,分成几个片段,MYC tag,转染进293T,其他片段都能用anti-MYC : antibody 检测到,只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的,总共不超过 : 10KD。),检测不到。但把这个片段克隆进原核表达 : 载体能在细菌中表达。 : 请问这是一种什么情况,大家遇到过么,怎么解决,谢谢!
| s**********a 发帖数: 92 | 3 谢谢!总共70个氨基酸。我可以试试加个大点的Tag. 另外,有防止降解的好方法么
,我试过MG132,不好使。
【在 e****s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 看多大了。这种片断,特别是小的,容易被降解。 可以试试看把它融合在一个蛋白的 : tag后面,GFP之类的。
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