Z******t 发帖数: 206 | 1 制造iPS的四个基因oct4 klf4 sox2 myc
可不可以先做stable cell line stably 表达其中三个
再转染剩下的那个基因得到iPS cell
这样生成iPS的效率会不会比同时转染四个基因高?
生成的iPS cell里外源基因表达都会被silenced
那如果只转染其中三个基因 再做selection 是不是可以稳定表达这三个外源基因不被
silenced? |
j******i 发帖数: 939 | 2 你这样的做目的是什么呢 如果是效率问题 完全没有必要啊 IPCs长的很快 而且有四个
因子连在一起的lentivirus可用 |
b********e 发帖数: 50 | 3 做iPS一般用原代细胞,体外最多可以传代50次? 表达3个基因的话,可能还没有做成
stable cell line,细胞就死翘翘了。做过iPS的同学建议一下呗。
【在 Z******t 的大作中提到】 : 制造iPS的四个基因oct4 klf4 sox2 myc : 可不可以先做stable cell line stably 表达其中三个 : 再转染剩下的那个基因得到iPS cell : 这样生成iPS的效率会不会比同时转染四个基因高? : 生成的iPS cell里外源基因表达都会被silenced : 那如果只转染其中三个基因 再做selection 是不是可以稳定表达这三个外源基因不被 : silenced?
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s********r 发帖数: 312 | 4 可以先转c-myc啊,转完就不怕细胞不长了哈哈
【在 b********e 的大作中提到】 : 做iPS一般用原代细胞,体外最多可以传代50次? 表达3个基因的话,可能还没有做成 : stable cell line,细胞就死翘翘了。做过iPS的同学建议一下呗。
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c*****y 发帖数: 35 | 5 首先我认为这个方法不太靠谱,其次也没有什么科学意义。如果是机制研究,mouse已
经实现small molecule reprogramming了,human也已早有单一OCT4实现Neural
progenitor cells reprogramming的案例。
如果是应用研究,那么现在主流的reprogramming都采用非整合方法了,质粒和mRNA都
很成熟方便,也已经都商业化了。用Retro和Lenti做出来的绝大多数iPS也被认为是质
量较差的细胞株,实用价值很低。 |