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Biology版 - CLONING
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m******t
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1
在做个MUTATION PLASMID。 在T-VEC里有这个MUTATION,可是转到我要的VECTOR里就
变成WT。 高手解释下。 多谢拉 我当然会继续挑索要的CLONE
j****n
发帖数: 3370
2
Quick change? Your template must be digested by DpnI before transformation.
In addition, make sure that you template is methylated.

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6

【在 m******t 的大作中提到】
: 在做个MUTATION PLASMID。 在T-VEC里有这个MUTATION,可是转到我要的VECTOR里就
: 变成WT。 高手解释下。 多谢拉 我当然会继续挑索要的CLONE

m******t
发帖数: 109
3
不是 quick change. 关键是从TVEC里切出来再装进自己的VEC,就没MUTATION了
s**2
发帖数: 1287
4
这么神奇呀? 把sequencing chromatogram贴出来看看。

【在 m******t 的大作中提到】
: 不是 quick change. 关键是从TVEC里切出来再装进自己的VEC,就没MUTATION了
m***y
发帖数: 627
5
感觉挺神奇,是否你的突变质粒不纯?你把初始vector自己转化下挑几个单克隆再测测
序吧。
然后再把测好突变的质粒再切连进新的vector里去再看看
m******t
发帖数: 109
6
sequenced Tvec again. mutation still there.
cut and ligate again. meibanfa
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