m******t 发帖数: 109 | 1 在做个MUTATION PLASMID。 在T-VEC里有这个MUTATION,可是转到我要的VECTOR里就
变成WT。 高手解释下。 多谢拉 我当然会继续挑索要的CLONE |
j****n 发帖数: 3370 | 2 Quick change? Your template must be digested by DpnI before transformation.
In addition, make sure that you template is methylated.
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 m******t 的大作中提到】 : 在做个MUTATION PLASMID。 在T-VEC里有这个MUTATION,可是转到我要的VECTOR里就 : 变成WT。 高手解释下。 多谢拉 我当然会继续挑索要的CLONE
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m******t 发帖数: 109 | 3 不是 quick change. 关键是从TVEC里切出来再装进自己的VEC,就没MUTATION了 |
s**2 发帖数: 1287 | 4 这么神奇呀? 把sequencing chromatogram贴出来看看。
【在 m******t 的大作中提到】 : 不是 quick change. 关键是从TVEC里切出来再装进自己的VEC,就没MUTATION了
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m***y 发帖数: 627 | 5 感觉挺神奇,是否你的突变质粒不纯?你把初始vector自己转化下挑几个单克隆再测测
序吧。
然后再把测好突变的质粒再切连进新的vector里去再看看 |
m******t 发帖数: 109 | 6 sequenced Tvec again. mutation still there.
cut and ligate again. meibanfa |