w********y
发帖数: 288 | 1 我有个实验需要在KO老鼠的脑子里表达被敲掉的基因，来rescure behavior；但是找不
到合适的vector，想请教一下这方面懂行的专家。主要是这个基因比较大，超过3 kb，
所以一般的AAV装不下；lentivirus听说transfection efficiency比较低，没用过。不
知道有没有效率高又能携带这么大的基因的vector (也不一定是virus,任何能实现目的
的手段都可以考虑），希望能得到一些建议，谢谢！ |
s*****i
发帖数: 315 | 2 把lenti上的筛选标记去掉能省1kb应该能包装出来
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
【在 w********y 的大作中提到】
: 我有个实验需要在KO老鼠的脑子里表达被敲掉的基因，来rescure behavior；但是找不
: 到合适的vector，想请教一下这方面懂行的专家。主要是这个基因比较大，超过3 kb，
: 所以一般的AAV装不下；lentivirus听说transfection efficiency比较低，没用过。不
: 知道有没有效率高又能携带这么大的基因的vector (也不一定是virus,任何能实现目的
: 的手段都可以考虑），希望能得到一些建议，谢谢！
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w********y
发帖数: 288 | 3 谢谢，你是说用正常情况lentivirus都装不进去？另外我听说lentivirus效率就不高，
用来做behavior rescure实验，即便能做出来，好多人也不认可，你觉这种说法对吗？
谢谢！
【在 s*****i 的大作中提到】
: 把lenti上的筛选标记去掉能省1kb应该能包装出来
:
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s*****i
发帖数: 315 | 4 Gene越大包装效率越低，你给自己的gene加个小tag，感染完了染色看看吧
没做过in vivo，不太清楚。
体外做时我从来不提纯病毒的，直接用medium感染，但是效果很好
你的靶细胞基本不会分裂，即使感染成功，整合到基因组的效率不会太高的。不知道有
没有基于transposon的系统
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【在 w********y 的大作中提到】
: 谢谢，你是说用正常情况lentivirus都装不进去？另外我听说lentivirus效率就不高，
: 用来做behavior rescure实验，即便能做出来，好多人也不认可，你觉这种说法对吗？
: 谢谢！
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