n*******l 发帖数: 75 | 1 请教构建lentivirus质粒的大拿,菜鸟求教
我想沉默pc12细胞的一个基因。查到某公司有公布的基因的沉默序列,在pGFP-shlenti
上。我想构建到lvthm上
问题是我们实验室构建的模版都是(21nt+9bp的loop+21nt的反向互补)在lVTHM上。公
司公布的是(29nt+7bp+29nt的反向互补)
。直接把用(29nt+9bp的loop+29nt的反向互
补)可以直接构建到lvthm上 影响沉默效率么,另外,loop的长短会影响沉默效率么。
万分感谢。 |
p********i 发帖数: 116 | |
n*******l 发帖数: 75 | 3 sigma 买什么? 我要的是大鼠的某个序列沉默。 |
d*****r 发帖数: 45 | 4 理论上不会影响吧,但我也没横向比较过7bp和9bp的loop效果到底差多少。
我们用过21+6+21的,效果最好能到90% |
r***e 发帖数: 2539 | 5 长度没问题(19-29都有),序列才是关键。最近在做一个22nt的序列,我一不小心漏了
5'一个nt,成了21nt竟然一点都不行。但并不是说21nt长度不行。(有点拗口,但就是
这个意思)
shlenti
【在 n*******l 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 请教构建lentivirus质粒的大拿,菜鸟求教 : 我想沉默pc12细胞的一个基因。查到某公司有公布的基因的沉默序列,在pGFP-shlenti : 上。我想构建到lvthm上 : 问题是我们实验室构建的模版都是(21nt+9bp的loop+21nt的反向互补)在lVTHM上。公 : 司公布的是(29nt+7bp+29nt的反向互补) : 。直接把用(29nt+9bp的loop+29nt的反向互 : 补)可以直接构建到lvthm上 影响沉默效率么,另外,loop的长短会影响沉默效率么。 : 万分感谢。
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a*******a 发帖数: 4233 | 6 origin, openbiosystem
【在 n*******l 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : sigma 买什么? 我要的是大鼠的某个序列沉默。
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j******n 发帖数: 941 | |