n*********s
发帖数: 552 | 1 做influenza感染模型，要取lung，新手。问一下perfuse到底怎么做，目的是什么，如
果要测lung里病毒的titer，perfuse是必须的吗？可以直接把lung消化了吗？多谢。 |
l*******n
发帖数: 554 | 2 楼主是说抽取brochoalveolar lavage fluid吗？
如果是的话，我们是在气管处减一小口，不能剪断，然后把一钝口针头伸入小口中，用
棉线将气管和针头扎紧，防止漏，接着将PBS注射入小鼠肺中，不用太多，看肺快要完
全扩展开来后停止，然后慢慢将BALF抽回针筒。
我们是用它来测细胞因子，病毒模型没做过，看看文献吧，看看有没其他人做过。 |
n*********s
发帖数: 552 | 3 谢谢答复，不过不是BAL，就是貌似注射器灌好hbss，然后从心脏打进去，hbss从心脏
进入肺里，肺就鼓起来了。是要去掉red blood cell吗？那为什么不用RBC lysis
buffer呢？
【在 l*******n 的大作中提到】
: 楼主是说抽取brochoalveolar lavage fluid吗？
: 如果是的话，我们是在气管处减一小口，不能剪断，然后把一钝口针头伸入小口中，用
: 棉线将气管和针头扎紧，防止漏，接着将PBS注射入小鼠肺中，不用太多，看肺快要完
: 全扩展开来后停止，然后慢慢将BALF抽回针筒。
: 我们是用它来测细胞因子，病毒模型没做过，看看文献吧，看看有没其他人做过。
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T****u
发帖数: 424 | 4 necroptosis和influenza感染，好topic~
KO mice有difference吗？Nec-1能protect吗？
【在 n*********s 的大作中提到】
: 做influenza感染模型，要取lung，新手。问一下perfuse到底怎么做，目的是什么，如
: 果要测lung里病毒的titer，perfuse是必须的吗？可以直接把lung消化了吗？多谢。
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n*********s
发帖数: 552 | 5 真是牛哥啊，看出俺是做这个的了。目前只做过一次pilot expt，还真有点差异，nec
－1还没试。想看下lung里的immune response，打算rt－pcr测下lung里cytokines，就
不知道harvest lung的时候有什么讲究没有？这年月我做的简直是天马行空，好多东西
都是现学啊～
【在 T****u 的大作中提到】
: necroptosis和influenza感染，好topic~
: KO mice有difference吗？Nec-1能protect吗？
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E*0
发帖数: 63 | 6 对的，目的就是为了去掉肺部的所有血细胞，结束以后肺应该是纯白色，为进一步分离
原代细胞做准备。测流感病毒titer可以不做perfuse。lysis buffer是专门裂解已经分
离好样品中污染的RBC的。希望这些信息会有帮助。
【在 n*********s 的大作中提到】
: 谢谢答复，不过不是BAL，就是貌似注射器灌好hbss，然后从心脏打进去，hbss从心脏
: 进入肺里，肺就鼓起来了。是要去掉red blood cell吗？那为什么不用RBC lysis
: buffer呢？
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n*********s
发帖数: 552 | 7 多谢！
【在 E*0 的大作中提到】
: 对的，目的就是为了去掉肺部的所有血细胞，结束以后肺应该是纯白色，为进一步分离
: 原代细胞做准备。测流感病毒titer可以不做perfuse。lysis buffer是专门裂解已经分
: 离好样品中污染的RBC的。希望这些信息会有帮助。
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T****u
发帖数: 424 | 8 你得把里面的血都去掉，否则一堆macrophage inflitration，测出来都是高的。
拿个免疫细胞的基因一起跑做参照。
有个问题RIP1/3在里面表达吗？
nec
【在 n*********s 的大作中提到】
: 真是牛哥啊，看出俺是做这个的了。目前只做过一次pilot expt，还真有点差异，nec
: －1还没试。想看下lung里的immune response，打算rt－pcr测下lung里cytokines，就
: 不知道harvest lung的时候有什么讲究没有？这年月我做的简直是天马行空，好多东西
: 都是现学啊～
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